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描述:
外泌体纯化试剂盒(SEC)是基于尺寸排阻色谱法(Size Exclusion Chromatography, SEC)原理的外泌体纯化试剂盒。色谱柱采用稳定、多孔的凝胶颗粒填充,将含有外泌体的溶液加入到SEC色谱柱中时,较小的颗粒将被捕获在孔中,而较大的分子则不会进入孔中并被先洗脱。因此,不同阶段的洗脱部分将包含不同大小的分子,首先是较大的外泌体颗粒,其次是较小的蛋白质和脂质颗粒。本试剂盒更适合用于下游为外泌体功能验证、表征、内容物的检测(核酸,蛋白,脂质和代谢物检测或组学分析)等的研究。
产品特点:
纯度高:杂质蛋白去除率高达99.44%,从源头保障后续研究的准确性。
方便快捷:操作简单,整个操作仅需30 min。
结果稳定:重复性高,实验结果高度吻合。
产品原理:
产品组分:
名称 | 规格 | 储存 |
SEC色谱柱(1mL) | 1mL | 2-8℃ |
Preservation Buffer(5×) | 20mL | 2-8℃ |
Balanced Buffer(10×) | 15mL | 2-8℃ |
Cleaning Buffer(10×) | 25mL | 2-8℃ |
使用方法:
1、打开柱塞,将 Preservation Buffer 排空。
2、上样量根据1mL填料可吸附10mg小分子蛋白载量计算,最小体积不应小于1mL。 样品如不足 1mL,则用 Balanced Buffer 稀释到1mL。
3、用5倍填料体积 Balanced Buffer(5 mL)平衡1次。
4、上 样 1mL 样品,待样品wan全进入填料并全部流出后,加入 Balanced Buffer 1mL,收集流出液(1mL)。
5、在位清洗:使用后用 Cleaning Buffer清洗10个柱体积(10mL),再用蒸馏水冲洗2个柱体积(2mL),Preservation Buffer冲洗1个柱体积(1mL),Preservation Buffer填满4℃保存。
使用次数:20次
注意事项:
1、样品过柱后若体积太大可以超滤浓缩以减小体积 (Milipore 超滤管,货号: UFC801096)。
2、Preservation Buffer (5×)、Balanced Buffer(10×)、Cleaning Buffer(10×) 均需要用去 离子水稀释到1×使用。
3、使用时应尽量保证柱内有液体,以确保填料能够被充分润湿。
4、为避免色谱柱堵塞,缓冲液和样品都必须用0.22μm 的滤膜过滤后使用。
5、使用结束后需要用封口膜将柱上端封死,避免 Preservation Buffer 挥发。
6、不同的上样体积和不同型号的色谱柱收集组分范围不同,刚使用时可以用 Dil 标记外泌体,用96孔板每孔收集1组分,并进行荧光强度检测,分析具体收集组分范围。
实验结果图:
本产品可将外泌体与非外泌体成分分开 |