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产品名称 | 非冻型尿液 DNA 保存液100mL图片 |
规格 | 100mL |
价格 | 电询 |
公司非冻型尿液 DNA 保存液100mL图片的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品:点击了解更RNA纯化。
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
图片的详细介绍:
非冻型尿液 DNA 保存液100mL图片DNA提取流程图:
问:常用的DNA 浓度及纯度检测方法有哪些?
称答:非冻型尿液 DNA 保存液100mL图片回收得到的DNA 可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。琼脂糖凝胶电泳通过对比定量的Marker 来定量浓度;紫外分光检测OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之间说明所得 DNA 纯度较好,如果洗脱时不使用溶液Eluent而使用去离子水,比值会偏低,因为pH 值和离子存在会影响光吸收值,但不表示纯度低。
问:长段回收时应注意哪些问题?
答:当DNA段长度较长(5 kb 以上)时,回收效率会有所下降,这是DNA 切胶回收时的常见现象。此时建议按以下方法解决问题:
1 适当增加待回收DNA 样品的点样量;
2 由于长段DNA 不易从树脂上洗脱下来,建议洗脱两次,可以提高洗脱效率;
3 减少操作过程中对长段DNA 的物理损伤,如混合振荡操作不要过于剧烈,切胶时不要将DNA 长时间暴露在紫外等下。
非冻型尿液 DNA 保存液100mL图片注意事项:
● 电泳时请使用新鲜配制的TAE 电泳缓冲液,以免影响电泳及回收效果。
● 请适当延长电泳时间,在条带分离清晰后进行切胶回收,以免回收到多余杂带。
● 为提高DNA 回收收率,切胶时应尽量除去多余的胶块。
● 本试剂盒纯化柱的DNA 吸附能力强。但如果DNA 浓度小,或DNA 初始量少,回收率将会偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 段可直接用于各种酶促反应等,不会影响后续试验。
● 为了保证回收效率,请不要使用未调整pH 值的超纯水洗脱目的段。
● 请严格按照操作步骤操作。邻溴三氟甲氧基苯 64115-88-4
4--3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]苯甲酸 641569-94-0
3-(4-1H-咪唑-1-基)-5-(三)苯胺 641571-11-1
9-蒽甲醛 642-31-9
1,2-二氟-4-碘代苯 64248-58-4
3,4-二氟苯腈 64248-62-0
3,5-二氟苯甲腈 64248-63-1
2,5-二氟苯腈 64248-64-2
活性炭 64365-11-3
4-氟-3-甲 64465-53-8
苯基二氯化磷 644-97-3
1-碘-3-硝基苯 645-00-1
基甲酰氯 6452-47-7
6-氯喹啉-8-羧酸 6456-78-6
4-羟 6457-49-4
1,3-二氧戊环 646-06-0
4-酸 646-07-1
碘乙酸 64-69-7 体
C1orf177 1号染色体开放阅读框177抗体
C1orf183 1号染色体开放阅读框183抗体
Clenbuterol 克仑特罗/瘦肉精抗体
C6orf151 6号染色体开放阅读框151抗体
C15orf52 15号染色体开放阅读框52抗体
C2orf89 2号染色体开放阅读框89抗体
CARD10 BCL10结合蛋白和激活核转录因子抗体
CARD15 凋亡加强结构域蛋白15抗体
CLLD6 慢性淋巴细胞白血病缺失基因6蛋白抗体
C13orf38 13号染色体开放阅读框38抗体
C14ORF140 14号染色体开放阅读框140抗体
CHAC2 阳离子转运调节样蛋白2抗体
非冻型尿液 DNA 保存液100mL图片C15orf62 15号染色体开放阅读框62抗体
C15orf41 15号染色体开放阅读框41抗体
CNGA2 环核苷酸阳离子通道蛋白α2抗体
硝酸铵 6484-52-2
操作步骤:
1 非冻型尿液 DNA 保存液100mL图片切取含有目的DNA段的琼脂糖凝胶条带。
● 尽量切除不含有目的DNA 部分的凝胶,减少凝胶体积,提高DNA 回收率。
● 切胶时,请使用长波长UV (360 nm )光盒。且不要将DNA 长时间暴露在紫外灯下,以防DNA 损伤。
2 称取凝胶的重量近似地确定其体积。
● 凝胶重量的称量方法:取1.5 ml 离心管电子天平称初质量,切胶装在离心管后称终质量,两者差即为胶的质量。不同离心管的重量可能有差异,因此,每个离心管的重量需单独称量。
3 按照每100 mg 琼脂糖凝胶对应100 µl 溶液BD 的比例,向离心管中加入溶液BD。
4 50 ℃水浴7-10min,直至凝胶*溶化。期间需要振荡混合3 次。
● 琼脂糖必须*融化,以免堵塞柱子,严重影响DN段的回收效率。
● 如果总体积大于500 µl,可适当增加溶胶时间。
● 若此时溶液变红,可加10 µl 3M NaAC (pH 5.2)。
5 将步骤4 所获溶液置于DNA 纯化柱中,静置2min 。
● 胶块*溶解后将胶溶液温度降至室温再上柱,因为纯化柱在较高温度时结合DNA 的能力较弱。
6 12,000 rpm 离心1min。若溶液量大于DNA 纯化柱的容积,可分两次离心,弃滤液。
● 此时DNA 片段被吸附于DNA 纯化柱中的硅胶膜上。
7 加入500 µl 溶液BD。12,000 rpm, 离心1min,弃滤液
8 加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm, 离心1min,弃滤液。
● 溶液PE 初次使用前用无水乙醇按1: 4 稀释,即含80% 乙醇。
● 此步骤的作用是将硅胶膜上吸附的蛋白、盐等杂质洗脱,以获得高质量DNA 片段。
9 加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm, 离心1min,弃滤液。
10 12,000 rpm 离心 3min ,以*去除纯化柱中的液体。
● 此步骤的作用是去除残留乙醇,避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DNA 片段的充分溶解。