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产品名称:糖原磷酸化酶b(GPb)紫外分光光度法
规格:50管/24样
测试方法:紫外分光光度法
分类:糖原系列
货号:GOY-01S6985
客户自备仪器和试剂
商品介绍:
测定意义 糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。GPb在一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。 测定原理: GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)时测定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。 需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
特点: 1、优化设计的实验方案,1小时即可完成 2、灵敏度高,操作便捷 3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂 | 仪器: 1、分光光度计/酶标仪(比色测定波长为550nm) 2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃) 3、台式离心机 4、漩涡混匀器 5、微量移液器 |
样品测定的准备:
1、细胞、细菌或组织样品的制备 :
细菌或细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,弃上清;按照每100万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次),之后置沸水浴振荡提取10min;10000g,常温离心10min,取上清,冷却后待测。
组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆;之后置沸水浴振荡提取10min,10000g,常温离心10min,取上清,冷却后待测。
2、血清(浆)样品:取100μL血清(浆)加入1mL提取液,充分混匀,之后置沸水浴振荡提取10分钟,10000g,常温离心10分钟,取上清,冷却后待测。
3、标准品的处理:称取1mg,将标准品稀释为15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
小鼠胎盘钙黏蛋白(P-Cadherin)联免疫吸附测定试剂盒N-乙酰-D-亮氨3-(三氟氧)苯酚 98%2-羟-5-氧苯 98%
小鼠原钙粘蛋白15(PCDH15)联免疫吸附测定试剂盒N-乙酰-D-亮氨4-氨-2-吡啶 98%2-羟-6-烟 98%
小鼠平足蛋白(PDPN)联免疫吸附测定试剂盒N-乙酰-D-亮氨2--4-吡啶 97%3-己炔-2- 97%
小鼠核因子κB2(NFκB2)联免疫吸附测定试剂盒N-乙酰-L-脯氨1,3,5-苯三 98%5-己烯-2- 98.5%
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)联免疫吸附测定试剂盒N-乙酰-L-脯氨4-乙烯吡啶 96% 六-1,3-丁二烯 分析标准品
小鼠鼠蛋白(NPHN)联免疫吸附测定试剂盒N-乙酰-L-脯氨L-谷氨酰 99%六-1,3-丁二烯 97.0%
小鼠性成纤维生长因子(AFGF/FGF1)联免疫吸附测定试剂盒N-乙酰-D-脯氨3-苯 98%正已酯 97%
小鼠成纤维生长因子19(FGF19)联免疫吸附测定试剂盒N-乙酰-D-脯氨二乙二二丁 99%1H,1H,10H,10H-全氟-1,10-癸二 96%
小鼠成纤维生长因子23(FGF23)联免疫吸附测定试剂盒N-乙酰-D-脯氨间二苯 99%1-庚炔-3- 97%
小鼠成纤维生长因子受体1(FGFR1)联免疫吸附测定试剂盒 芴氧羰酰琥珀酰亚二乙二二乙 98%3-羟-2- 98%
小鼠Toll样受体4(TLR4)联免疫吸附测定试剂盒芴氧羰酰琥珀酰亚二乙二二乙 for HPLC, ≥99%1,3-二-2-苯 98%
小鼠Toll样受体2(TLR-2/CD282)联免疫吸附测定试剂盒 芴氧羰酰琥珀酰亚乙二二乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)代异戊烷 97%
小鼠降钙素原(PCT)联免疫吸附测定试剂盒 芴氧羰酰琥珀酰亚乙二二乙 CP,95%草铁(II) 99.999% (metals basis)
小鼠酪氨羟化(TH)联免疫吸附测定试剂盒2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟磷酯乙二二乙 99%乙 AR,98%
小鼠上腺髓质素(ADM)联免疫吸附测定试剂盒 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟磷酯乙二二 AR,99.5%(GC)1-戊烷 98%,含稳定剂铜屑
小鼠Apelin蛋白(APLN)联免疫吸附测定试剂盒2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟磷酯乙二二 for HPLC, 99.5%茚满 95%
糖原磷酸化酶b(GPb)紫外分光光度法绵羊不均一核糖核蛋白A2/B1 (HNRPA2B1)联免疫吸附测定试剂盒1-辛-3-咪唑四氟盐枯草芽孢杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
绵羊拮抗凋亡转录因子(AATF)联免疫吸附测定试剂盒1-辛-3-咪唑四氟盐果生链核盘菌拉丁属名: Monilinia fructicola
绵羊质金属蛋白25(MMP-25)联免疫吸附测定试剂盒2-溴苯美澳型核果褐腐病菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
绵羊白共同抗原(LCA/CD45)联免疫吸附测定试剂盒2-溴苯凝结芽胞杆菌拉丁属名: Bacillus pumilus
绵羊周期素依赖性激1(CDK1)联免疫吸附测定试剂盒 2-溴苯短小芽孢杆菌拉丁属名: Torula herbarum
绵羊血小板型磷果糖激(PFKP)联免疫吸附测定试剂盒二十四烷酯草色串孢拉丁属名: Cordyceps sobolifera
绵羊角膜蛋白(KERA)联免疫吸附测定试剂盒还原型 S-己-L-谷胱甘肽多座虫草*注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
绵羊巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α)联免疫吸附测定试剂盒还原型 S-己-L-谷胱甘肽黑木耳拉丁属名: Aspergillus niger
绵羊水通道蛋白1(AQP-1)联免疫吸附测定试剂盒 (S)-2-三氟-2-羟黑曲霉拉丁属名: Arthrobacter subterraneus
绵羊苯诺龙/苯去睾(NP)联免疫吸附测定试剂盒2-地下节杆菌拉丁属名: Bacillus amyloliquefaciens
绵羊抗髓磷脂抗体IgA(AMA IgA)联免疫吸附测定试剂盒 2-解淀粉芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis
绵羊接触蛋白3(CNTN3)联免疫吸附测定试剂盒2-枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus aryabhattai Shivaji et al
绵羊接触蛋白4(CNTN4)联免疫吸附测定试剂盒9-乙烯蒽注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
绵羊溶菌(LZM)联免疫吸附测定试剂盒 9-乙烯蒽小链霉菌拉丁属名: Chaetomium funicola
绵羊衰老关键蛋白5(FBLN5)联免疫吸附测定试剂盒2-丁2-丁酯绳生毛壳拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
绵羊白分化抗原CD4(CD4)联免疫吸附测定试剂盒 2-丁2-丁酯酿酒酵母注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用