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检测骨代谢抗酒石酸酸性磷酸酶5B试剂盒

广州健仑生物科技有限公司

 公司号码：0 2 0-8 2 5 7 4 0 1 1

    我司提供 产品涉及抗原抗体，质控，违禁品检测试剂、食品检测试剂、临床快速诊断试剂、动物疾病防疫检测试剂，免疫诊断试剂、微生物检验试剂、分子生物学检验试剂、血清等ELISA检测试剂，详细了解广州健仑随时欢迎您的来电

检测骨代谢抗酒石酸酸性磷酸酶5B试剂盒

试剂盒规格：96T/盒

试剂盒用途

• 5b(TRACP-5b)的含量
• ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)含量。
• 200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml
• 5b(TRACP-5b)ELISA检测试剂盒需要而未提供的试剂和器材】
• 、37℃恒温箱
• 5b(TRACP-5b)ELISA检测试剂盒操作步骤】
• 、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
• 、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
• 、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。
• 、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
• 、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
• 、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。
• 、温育：重复4的操作。
• 、洗板：重复5的操作。
• 、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，37℃避光显色15min。
• 、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。
• 、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。
• 、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
•  
• 、样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
• 、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
• 、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。
•  
• 、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
• 、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
• 、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
• 、牢记样本已经稀释5倍，计算结果乘以5才是样本实际浓度。
• 、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（0.1-200ng/ml范围内），乘以总稀释倍数即为样本zui终浓度。
• 、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。
• 、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。
• 、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。
• 、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
• 37℃反应30分钟
• 4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟
• 4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

1. 分钟之内读OD值

我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、流感、A链球菌、合胞病毒、腮病毒、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌、化妆品检测、食品安全检测等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

以下是我司出售的部分产品

英国IDS抗酒石酸酸性磷酸酶5b检测试剂盒

2、饱和硫酸铵溶液的pH7.0或7.2影响不大，也有调到7.4的，因为最后沉淀的 蛋白一般都是用PBS稀释的，硫酸铵的pH值对蛋白溶液影响不大。卵黄琼脂培养基用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养和卵磷脂酶试验。其主要成 份有肉浸液、蛋白胨、氯化钠、琼脂粉、葡萄糖水溶液和50%卵黄盐水悬液。 检测原理是基于将产气荚膜梭菌划线接种于卵黄琼脂平板厌氧培养后，由于细 菌能产生卵磷脂酶，分解卵黄中的卵磷脂生成不溶性甘油酯形成乳白色混浊带 ，因此会在菌落周围及底部形成乳白色的混浊带。1、卵黄琼脂培养基用途：卵黄琼脂培养基（Egg yolk agar base）用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养和 卵磷脂酶试验。2、培养基配制方法：（1）基础培养基肉浸液 1000mL蛋白胨 15g氯化钠 5g琼脂 25～30gpH7.5（2）50%葡萄糖水溶液。（3）50%卵黄盐水悬液。制法：制备基础培养基，分装每瓶100mL。121℃高压灭菌15min。临用时加热 溶化琼脂，冷至50℃，每瓶内加入50%葡萄糖水溶液2mL和50%卵黄盐水悬液10 -15mL，摇匀，倾注平板。3、50%卵黄盐水悬液配制方法（1）买新鲜鸡蛋，用流水将蛋壳表面洗净，沥干；（2）将洗净的鸡蛋放于70%乙醇中浸泡1h；（3）以无菌操作取出蛋黄，加等体积无菌0.9%氯化钠溶液（生理盐水）；（4）混匀后置4°C贮存备用。