外包服务 树脂包埋透射电镜

外包服务 树脂包埋透射电镜，树脂包埋实验步骤：1、取材：电镜取材非常严格，取材过程中速度要快，5分钟内要将组织取出放入固定液中；取材组织块要小，一般要求将组织切成1立方毫米大小；取材部位要准确、取材温度要低是在4℃条件下进行；取材工具要干净，锋利。如果是贴壁细胞不可用酶消化下来，先吸去培养液然后加入电镜固定液用橡胶块刮下细胞，离心，细胞体积保证绿豆大小即可，然后吸去上清更换固定液继续固定。2、固定：取材后要及时固定，组织、细胞、蛋白等固定选用2.5%中性戊二醛固定液，植物等标本则需要选用多聚甲醛和戊二醛的混合固定液。室温固定两小时左右后，放入4℃保存运输（如果是植物或者肺组织，则需要进行真空抽气固定，一般需要抽气固定24小时左右，直至标本*沉入容器底部）。3、锇酸后固定：将标本从固定液中取出，用0.1mol/L的PB清洗并过夜，第二天转入1%锇酸后固定，固定时间普通标本2h左右，植物标本8至12h左右。3、脱水：锇酸固定后的标本用用0.1mol/L的PB清洗后使用梯度乙醇脱水，浓度依次是50%、70%、80%、90%、95%、100%，植物标本则会在50%乙醇前面再增加一个30%乙醇梯度，脱水时间普通标本为10~15min，植物标本脱水时间为1~1.5h4、浸透：用丙酮作为乙醇和树脂间的过度溶剂，从纯丙酮开始，中间经过丙酮和树脂的混合剂，混合比例丙酮从高到低到纯树脂，整个浸透过程需要1~2天完成。5、包埋：先将组织对应的标签放包埋板中，然后加入树脂，再将浸透好的样本放入包埋板中，调整好包埋面，然后放入恒温箱内熟化，熟化过程需要2~3天。熟化完成后，样本树脂包埋完成。