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小鼠IgM ELISA试剂盒是一种体外免疫测定法,用于定量体内循环的IgM血清或来自组织液(如唾液、粘膜)的其他适当合格的样本,或小鼠细胞培养物。仅供研究使用(RUO),不用于诊断、治疗或预防疾病。
作为Alpha Diagnostic International(ADI)在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐Alpha Diagnostic International(ADI)热销产品小鼠 IgM ELISA 试剂盒,96 次检测,定量。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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小鼠 IgM ELISA 试剂盒,96 次检测,定量 | ADI-6380 | 查看 |
小鼠 IgM ELISA 试剂盒,96 次检测,定量检测原理:
小鼠IgM ELISA试剂盒基于小鼠IgM在将样品与两种抗体分离,其中一种固定在微量滴定孔上,另一种与辣根过氧化物酶(HRP)结合。洗涤步骤后,加入显色底物并着色由HRP在TMB底物上的酶反应产生,其与存在于细胞中的IgM的量成正比样品。加入终止溶液以终止反应,以及然后使用ELISA微量滴定仪测量450nm处的吸光度好读者。样本和对照中的IgM浓度为根据包含已知标准的曲线计算IgM的浓度。
特异性
本试剂盒中使用的抗体已通过免疫电泳和ELISA显示,它们与IgM特异性反应,并且与IgG、IgA、IgE或其他小鼠血清蛋白几乎没有反应性。
以下物种的血清在1:400稀释度下显示无显著反应性:
人类、大鼠、仓鼠、豚鼠、牛、猪、马、羊、山羊、狗、猫、兔子或鸡;还有10%新生牛血清。
正常范围
对二十(20)只个体瑞士小鼠的储存血清进行IgM检测,范围从22到712微克/毫升(中位数=519微克/毫升)。每个实验室应确定其自身测试人群的预期值。
精度
含有低、中、高浓度IgM的样本,代表3种不同的血清,在相同检测中多次检测(n=10)以提供检测内精度,并作为多个检测中的重复样本(n=5)以获得检测间可重复性。使用点对点曲线拟合程序计算浓度的变异系数。
IgM浓度的检测内(3.9至6.7% CV)和检测间(5.2至8.5% CV)可重复性非常好。
结果计算
1. 结果可以使用任何免疫分析软件包进行计算。推荐使用四参数曲线拟合。如果软件不可用,可以按照以下方法确定IgM浓度:
2. 计算重复样本的平均OD值。
3. 在坐标纸上,将标准品的平均OD值(y轴)与IgM的浓度(ng/ml)(x轴)作图。通过这些点绘制最佳拟合曲线以构建标准曲线。点对点构造最常见且可靠。
4. 可以通过标准曲线插值确定未知样本和对照品中的IgM浓度。
5. 将样本获得的值乘以每个样本的稀释因子。
6. 产生信号高于200 ng/ml标准品的样本应进一步稀释并重新检测。
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