ATCC 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
细胞名称 人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;C918培养
形态特性 多角
品牌 贴壁生长
特征特性 STR检测发现三株人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞C918、M619和Mum-2B为同一遗传背景,怀疑存在交叉污染。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;20mM Hepes
传代方法 1:
3传代;2~3天1次。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:11;D16S539:8,12;D18S51:15;D19S433:13,14;D21S11:30;D2S1338:24,25;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:12;D8S1179:13;FGA:20,21;TH01:8,9.3;TPOX:11;vWA:16,17;
同工酶
染色体
使用权限 A类
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;C918培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Rabbit Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根过氧化物酶标记可溶性纤维蛋白原抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.1ml
CBX5(Chromobox Homolog 5) CBX5(多肽)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Park7/DJ-1/CAP1抗体 Anti-CAP1/Park7/DJ-1 0.1ml
SENP5 英文名称: 泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶5抗体 0.2ml
E2 tag 英文名称: E2 tag标签抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HSL (Ser865) 磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体 规格 0.1ml
CBX5(Chromobox Homolog 5) CBX5(多肽)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Trx(Human Thioredoxin) ELISA Kit 人硫氧化还原蛋白Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-HER2(Tyr1112) 磷酸化HER2受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Microsporidia protien 蜜蜂微孢子虫蛋白抗体 规格 1ml
HSL(Human hormone sensitive lipase) ELISA Kit 人激素敏感性脂肪酶 96T
RNF210 英文名称: 环指蛋白210抗体 0.2ml
CES2 英文名称: 羧酸酯酶2抗体 0.1ml
Anti-Phospho-HER2(Tyr1112) 磷酸化HER2受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
大鼠Slit同源物3(Slit3)ELISA试剂盒,英文名:Slit3 ELISA KiISA Kit for Human Growth hormone receptor小鼠基质金属蛋白酶8(MMP8)ELISA试剂盒,英文名:MMP8 ELISA KiISA Kit for Human High mobility group protein HMGI-C小鼠法尼酯X受体(FXR)ELISA试剂盒,英文名:FXR ELISA KiISA Kit for Human Interleukin-36 alpha小鼠白介素1受体Ⅱ(IL1R2)ELISA试剂盒,英文名:IL1R2 ELISA KiISA Kit for Human Interleukin-1 receptor type 2小鼠B-细胞激活因子(BAFF)ELISA试剂盒,英文名:BAFF ELISA KiISA Kit for Human Leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor 1大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒,英文名:FFA ELISA KiISA Kit for Human Monofunctional C1-tetrahydrofolate synthase, mitochondrial大鼠细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)ELISA试剂盒,英文名:SOCS-3 ELISA Kit
豚鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒,英文名:IL-13 ELISA KiISA Kit for Human Melanoma antigen recognized by T-cells 1大鼠缺氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒,英文名:HIF-1α ELISA KiISA Kit for Human Atrial natriuretic peptide receptor 1大鼠可溶性CD105(sCD105)ELISA试剂盒,英文名:sCD105 ELISA KiISA Kit for Human Oxidized low-density lipoprotein大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)ELISA试剂盒,英文名:CASP7 ELISA KiISA Kit for Human Gamma-secretase subunit PEN-2大鼠雌激素受体(ER)ELISA试剂盒,英文名:ER ELISA KiISA Kit for Human Pappalysin-1大鼠TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)ELISA试剂盒,英文名:TIEG1 ELISA KiISA Kit for Human Rho-associated protein kinase 2大鼠组胺H3受体(HRH3)ELISA试剂盒,英文名:HRH3 ELISA Kit
过氧化物酶阻断剂B 10ml 推荐用于石蜡切片,孵育10分钟.
VHLH 英文名称: 脑视网膜血管瘤G7蛋白抗体(逢希伯-林道氏病) 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CaMK2 alpha (Thr305) 磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体 规格 0.1ml
L-HDC (L-Histidine decarboxylase) L-组氨酸脱羧酶抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Dbx2 英文名称: 大脑发育同源蛋白2抗体 0.2ml
Anti-Angiotensin II type 1A receptor 血管紧张素Ⅱ1A型受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD36L1/SRB1 /FITC 荧光素标记高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-PEPT1/FITC 荧光素标记肠道肽转运蛋白1/小肽转运蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh B7-DC/CD273/PDL2 程序性死亡配体2抗体 规格 0.1ml
Acinus peptide ACINUS 多肽抗原 0.5mg
GMRP1 英文名称: 糖代谢相关蛋白1抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-pig IgG/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗猪IgG 规格 0.1ml
Anti-PEPT1/FITC 荧光素标记肠道肽转运蛋白1/小肽转运蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。