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人神经胶质细胞瘤细胞;U251价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 人神经胶质细胞瘤细胞;U251价格
形态特性 成纤维细胞样
品牌 贴壁生长
特征特性 该细胞分离一位患者的胶质母细胞瘤组织。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-TNFSF18/GITR Ligand/FITC 荧光素标记坏死因子配体超家族成员18抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
BMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形态发生蛋白4(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
血栓调节蛋白抗体 Anti-TM 0.2ml
5HT2A Receptor 英文名称: 5-羟色胺受体2A抗体 0.2ml
ETFA 英文名称: 电子转移黄素蛋白α抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-JunB(Ser79) 磷酸化活化蛋白激酶B抗体 规格 0.1ml
BMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形态发生蛋白4(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
SPA(Human Staphylococal protein A) ELISA Kit 人葡萄球菌蛋白AMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-MCP-3/CCL7 单核细胞趋化蛋白3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh K Cadherin 钙粘蛋白6抗体 规格 0.2ml
Human Tetanus Antibody ELISA Kit 人破伤风抗体 96T
PTP/PTPase/CD148 英文名称: 蛋白酪酸磷酸酶CD148抗体 0.2ml
CD226 英文名称: CD226抗体 0.1ml
Anti-MCP-3/CCL7 单核细胞趋化蛋白3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
TSST-1(Human toxic shock syndrome toxin) ELISA Kit 人毒性休克综合征毒素1 96T
SUPT16H 英文名称: 染色体特异性转录延伸因子抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh MRC2/CD280 巨噬细胞甘露糖受体2抗体 规格 0.1ml
MIP-1 Alpha 小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1αMulti-class antibodies规格: 48T
Calcium Sensing Receptor 英文名称: 钙敏感受体1抗体 0.2ml
Anti-factor VIII(FVIII) human 第八因子相关抗原抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
EGFR 小鼠表皮生长因子受体Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-ATEXPA10 植物延长蛋白(拟南芥)Multi-class antibodies规格: 1ml
Rhesus antibody Rh MRP5/ABCC5 多药耐药相关蛋白5抗体 规格 0.1ml
anti-CMV IgM(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit 人抗巨细胞病毒抗体IgM 96T
Sclerostin 英文名称: 骨形态发生抑制蛋白SOST抗体 0.2ml
C1orf94 英文名称: 1号染色体开放阅读框94抗体 0.2ml
Anti-ATEXPA10 植物延长蛋白(拟南芥)Multi-class antibodies规格: 1ml