ATCC 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
细胞名称 人急性单核细胞白血病细胞;THP-1培养
形态特性 淋巴母细胞样
品牌 悬浮生长
特征特性 该细胞从一名1岁的患有急性单核细胞性白血病的男孩的外周血中分离建立。该细胞可以吞噬乳胶颗粒和激活的红细胞,细胞膜和胞浆内均没有免疫球蛋白,表达C3R和FcR;可受佛波酯TPA诱导向单核系方向分化;可作为转染宿主。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 C54
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
人急性单核细胞白血病细胞;THP-1培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-VEGFR-3/FLt-4 /FITC 荧光素标记血管内皮细胞生长因子受体-3IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
C-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4) c-erbB-4癌基因抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
CD68抗体(人、) Anti-CD68 0.1ml
SLC25A6 英文名称: 线粒体载体腺嘌呤核苷酸转运蛋白6抗体 0.2ml
ETFDH 英文名称: 电子转移黄素蛋白脱氢酶抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GATA-4(ser 262) 磷酸化GATA结合蛋白4抗体 规格 0.1ml
C-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4) c-erbB-4癌基因抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
SP-A ELISA Kit 大鼠肺表面活性物质相关蛋白AMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-Urocortin 3 尿皮质素UCN3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GCP-2 粒细胞趋化蛋白2抗体 规格 0.1ml
EM-2(Human endomorphin-2) ELISA Kit 人内肽-2 96T
Nanos3 英文名称: 骨巢蛋白抗体 0.2ml
Alpha 2 antiplasmin 英文名称: α2纤溶酶色素上皮衍生因子抗体 0.2ml
Anti-Urocortin 3 尿皮质素UCN3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
TSP-1 ELISA Kit 大鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1 96T
Nkx2.5 英文名称: 心脏特异性同源盒转录因子NKX2.5抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh GLCNE GLCNE蛋白抗体 规格 0.2ml
PA-IgG/M/A ELISA Kit 大鼠抗血小板抗体IgG/M/AMulti-class antibodies规格: 48T
ATP7A 英文名称: 铜转运蛋白质α链抗体 0.1ml
Anti-TRADD 死亡区的坏死因子受体1相关蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-DEC-205/CD205/Ly75/FITC 荧光素标记CD205抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-MAP-2/FITC 荧光素标记微管相关蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Calmodulin/CaM I 钙调节素抗体(钙调蛋白/钙调素) 规格 0.1ml
Anti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii) 环子孢子蛋白(约氏疟原虫)抗原 0.5mg
HSD3B7 英文名称: 滋养层细胞抗原3β7抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh SERPINB10 丝氨酸蛋白酶抑制剂B10抗体 规格 0.2ml
Anti-MAP-2/FITC 荧光素标记微管相关蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。