Wako/和光纯药 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
盖玻片产品概述:
盖玻片
英文名称:Cover glass
规格:24×24mm
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)
保存:RT
公司优势:
我司为专业的生物试剂公司,不仅代理各种知名的国际国内品牌,还注重自身的和,具备一定的专业背景和实力基础。我司成立较早,在残酷的竞争环境中屹立至今,这与我们诚信至上以及注重专业实力的信念是离不开的。经过多年的摸爬滚打,我司拥有属于自己的营销理念和方法。我司定位明确,客户精准,眼光高远,立足于当下前沿性的科研领域,提供当前科研所需的试剂以及耗材产品,客户遍布各大高校、科研院所以及其他性的企业。关于盖玻片订购事宜以及合作详情可点击这里咨询我们。
Western Blot操作方法:
1.培养细胞蛋白质样品的制备:
1)在合适的盐浓度下,应保持蛋白质的最大溶解性和可重复性。
2)选择合适的表面活性剂和还原剂,破坏所有非共价结合的蛋白质复合物和共价键二硫键,使其形成一个各自多肽的溶液。
3)尽量去除核酸,多糖,脂类等干扰分子。
4)防止蛋白质在样品处理过程中的人为的修饰,制备过程应在低温下进行,以避免细胞破碎释放出的各种酶类的修饰(建议加入合适的蛋白酶抑制剂)
5)样品建议分装成合适的量,然后冷冻干燥或直接以液体状态置-80℃中保存,但要注意不要反复冻融。
2.组织样品的制备:
手术切除的组织块迅速置于预冷的0.95生理盐水中,漂洗数次,以清洁表面的血迹,将组织称量后切成几个较小的组织块放入机戒组织匀浆器中,按组织净重,裂解液=1:10的比例,加入相应体积的裂解液进行匀浆,离心收集上清(如有粘稠物可超声处理,具体方法见细胞培养的样品制备,也可以冷冻干燥降解核酸后,将冻干的蛋白质样品溶解在适当的上样 buffer中,混匀后静置3小时使样品中的蛋白质充分的溶解,有5分钟即可,4度离心收集。)加入Laemmli样品缓冲液(视蛋白样品浓度,以1:1或1:2的比例混合)强力混匀,样品置100度的水浴箱水浴加热3-5分钟,10000g离心10分钟,取上清液,将其转入另一洁净的试管中,至此,电泳样品已准备就绪(样品即可立即使用也可也可以分装冻存,-20℃存放的样品可稳定保持数月。)
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