谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)紫外分光光度法

谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)紫外分光光度法

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具体成交价以合同协议为准
2022-03-08 14:34:48
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供货周期:现货;规格:50管/48样;货号:YS-01S6387;应用领域:化工;主要用途:公司产品仅供于科研使用;
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供货周期
现货
规格
50管/48样
货号
YS-01S6387
应用领域
化工
主要用途
公司产品仅供于科研使用
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上海研生实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

基本信息:

产品名称:谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)紫外分光光度法

测试方法:紫外分光光度法

规格 : 50管/48样

货号:YS-01S6387

测定意义

GR是广泛存在于真核和原核生物中的一种黄素蛋白氧化还原酶,通常昆虫中GR被TrxR取代,是谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶之一。GR催化NADPH还原GSSG生成GSH,有助于维持体内GSH/GSSG比值。GR在氧化胁迫反应中对活性氧清除起关键作用,此外GR还参与抗坏血酸-谷胱甘肽循环途径。

测定原理

GR能催化NADPH还原GSSG再生GSH,同时不断消耗NADPH;通过测定NADPH减少量,即可测定GR活性。

实验中所需仪器及设备

紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、移液器、1ml石英比色皿、双蒸水
用途范围:仅供科研研究实验

需自配仪器:

1、酶标仪(比色测定波长为450nm)

2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)

3、微量移液器

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

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