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实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
基本信息:
产品名称:丙酮酸激酶(PK)微量法
测试方法:微量法
规格 : 100管/96样
货号:YS-01S6645
测定意义
PK(EC 2.7.1.40)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化糖酵解过程中的最后一步反应,是糖酵解过程中的主要限速酶之一,也是产生ATP的关键酶之一,因此测定PK活性具有重要意义。
测定原理
PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PK活性。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水
用途范围:仅供科研研究实验
需自配仪器:
1、酶标仪(比色测定波长为450nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、微量移液器
下列是公司正在热销的产品:
大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)酶联吸附测定试剂盒拟粉红锁掷孢酵母α-Amylase (D55H10) XP® Rabbit mAb
大鼠血小板/内皮粘附分子(PECAM1)酶联吸附测定试剂盒斯氏梭α-Amylase (D55H10) XP® Rabbit mAb
大鼠血小板白C激酶底物同源性样域家族A成员2(PHLDA2)酶联吸附测定试剂盒阿舒假囊酵母VIP (D8J1V) Rabbit mAb (IHC Formulated)
大鼠多效生长因子(PTN)酶联吸附测定试剂盒酿酒酵母Mouse (E1D5H) mAb IgG3 Isotype Control
大鼠足标志蛋白(PCX)酶联吸附测定试剂盒猪链球ERp44 (D17A6) XP® Rabbit mAb
大鼠脊髓灰质炎病受体相关蛋白1(PVRL1)酶联吸附测定试剂盒枯草芽胞杆ERp44 (D17A6) XP® Rabbit mAb
大鼠脊髓灰质炎病受体相关蛋白2(PVRL2)酶联吸附测定试剂盒节状镰孢MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb
大鼠正向辅助因子4(PC4)酶联吸附测定试剂盒直丝淡紫灰链霉MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb
大鼠前白蛋白(PA/PLB)酶联吸附测定试剂盒慢生根瘤PPIG Antibody
大鼠凝血因子XI(FXI)酶联吸附测定试剂盒樟疫霉Phospho-PPIG (Ser376) Antibody
大鼠前心钠肽(Pro-ANP)酶联吸附测定试剂盒产气荚膜梭 素D型Phospho-Rictor (Thr1135) (D30A3) Rabbit mAb
大鼠前降钙素(PCT)酶联吸附测定试剂盒产气弧Phospho-Rictor (Thr1135) (D30A3) Rabbit mAb
大鼠I型前胶原N端前肽(PINP)酶联吸附测定试剂盒醋化醋杆IRAP Antibody
大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)酶联吸附测定试剂盒酿酒酵母FastScan™ Phospho-Vimentin (Ser56) ELISA Kit
大鼠III型前胶原氨基端肽(PIIINP)酶联吸附测定试剂盒鲁氏接合酵母Enolase-1 Antibody
丙酮酸激酶(PK)微量法克仑特罗/瘦肉精抗体Human α1-AT(Alpha 1-Antitrypsin) ELISA Kit人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒,EL ELISA
6号染色体开放阅读框151抗体Human α2-AP(α2-Antiplasmin) ELISA Kit人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒,
15号染色体开放阅读框52抗体Human αHSP(Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein) ELISA Kit人类风湿因子(RF)ELISA试剂盒,
2号染色体开放阅读框89抗体Human β-actin(Beta actin) ELISA Kit人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒,
BCL10结合蛋白和激活核转录因子抗体Human ACP(Acid phosphatase) ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒,
凋亡加强结构域蛋白15抗体Human MBP(myelin basic protein) ELISA Kit小鼠嗜酸性粒阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒,
慢性白血病缺失基因6蛋白抗体Human SOCS4(Suppressor Of Cytokine Signaling 4) ELISA Kit小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒,
13号染色体开放阅读框38抗体Human AA(Arachidonic Acid) ELISA Kit小鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒,