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需自配仪器:
1、酶标仪(比色测定波长为450nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、微量移液器
基本信息:
产品名称:NAD激酶(NADK)可见分光光度法
测试方法:可见分光光度法
规格 : 50管/24样
货号:YS-01S6324
测定意义
NADK(EC 2.7.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是目前所发现的生物体内惟一能够催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或无机多聚磷酸[poly(P)]作为磷酰基供体进行磷酸化反应,生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及调节NAD(H)与NADP(H)的平衡上具有重要作用。
测定原理:
NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPH;NADPH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT),通过在600 nm下测定MTT的还原速度(吸光值的变化)可反映出NADK活性的大小。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
用途范围:仅供科研研究实验
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
下列是公司正在热销的产品:
人胱天蛋白酶1(CASP1)酶联吸附测定试剂盒棕褐小单孢Phospho-Stat6 (Tyr641) (D8S9Y) Rabbit mAb (Alexa Fluor®647 Conjugate)
人半胱天冬酶3(CASP3)酶联吸附测定试剂盒猴头Phospho-NF-kappaB p105 (Ser933) Blocking Peptide
人组织蛋白酶B(CTSB)酶联吸附测定试剂盒FrigoribacteriumPhospho-IKK-alpha/beta (Ser176/180) Blocking Peptide
人组织蛋白酶V(CTSV)酶联吸附测定试剂盒大肠杆β-Actin Blocking Peptide
人单核趋化蛋白1(MCP-1)酶联吸附测定试剂盒枯草芽胞杆Phospho-Bad (Ser112) Blocking Peptide
人巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α)酶联吸附测定试剂盒菊异茎点霉Phospho-GSK-3α (Ser21) Blocking Peptide
人巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β)酶联吸附测定试剂盒 苍黄链霉CD38 (HIT2) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjugate)
人调节正常T表达和分泌因子(RANTES)酶联吸附测定试剂盒 假单孢IDO (D5J4E™) Rabbit mAb (PE Conjugate)
人单核趋化蛋白3(MCP-3)酶联吸附测定试剂盒大肠埃希氏Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
人嗜酸粒趋化因子(ECF/CCL11)酶联吸附测定试剂盒三叶草根瘤Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
人胸腺激活调节趋化因子(TARC)酶联吸附测定试剂盒委内瑞拉链霉β-Tubulin Blocking Peptide
人巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)酶联吸附测定试剂盒红色红曲 Cytochrome c Blocking Peptide
人二级组织趋化因子(SLC)酶联吸附测定试剂盒冬虫夏草COX IV Blocking Peptide
人巨噬来源的趋化因子(MDC)酶联吸附测定试剂盒莫哈韦芽孢杆Mre11 Blocking Peptide
人髓样前体抑制因子2(MPIF2)酶联吸附测定试剂盒海洋杆PU.1 Blocking Peptide
NAD激酶(NADK)可见分光光度法2号染色体开放阅读框88抗体Human anti-2019 nCoV(S) IgG ELISA KitⅡ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒--动物,人
G蛋白偶联受体ARHGEF18抗体Human OTUD5(OTU domain containing 5) ELISA Kit促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒--动物,人
激活素受体1B抗体Human MARK2 ELISA KitCBZ-L-丙氨酸
雄受体相关蛋白24抗体Human MARK3 ELISA Kit小鼠心钠肽(ANP)ELISA试剂盒,
淀粉样肽前体蛋白抗体(C端)Human MARK1 ELISA KitEB病IgM(EBv IgM)ELISA试剂盒--动物,人
腺苷酸环化酶2抗体Human MARK4 ELISA Kit糖皮质受体α(GR-α)ELISA试剂盒--动物,人
载脂蛋白C3抗体Human MARS ELISA Kit小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA试剂盒,
载脂蛋白E4抗体Human MARVELD2 ELISA Kit小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒,
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。