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上海市所在地
参数规格：
产品名称：DNA扩增试剂盒48T
产品货号：FS-02R6718
产品规格：48T
产品分类：恒温扩增法
产品运输：低温运输
实验过程：
一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 |
注意事项
1.公司产品仅用于科研整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6.为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
F X III ELISA Kit 大鼠因子ⅩⅢMulti-class antibodies： 48T
thrombin II Ⅱ抗体Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GM-CSFR β/CSF2RB 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体β抗体 0.2ml
GRO Gamma/CXCL3/MGSA(Human growth-regulated oncogene Gamma/melanoma growth stimulating activity) ELISA Kit 人生长调节致癌基因γ/黑瘤生激因子 96T
Nur77 孤儿核受体蛋白Nur77抗体 0.1ml
phospho-GEF H1 (Ser886) 磷化Rho鸟苷交换因子2抗体 0.1ml
thrombin II Ⅱ抗体Multi-class antibodies： 0.2ml
CCSA-4(Human colon cancer-specific antigen-4) ELISA kit 人大肠癌专一抗原4Multi-class antibodies： 48T
HCV-Core 丙型肝炎病毒-C区抗体Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mimitin MYC诱导线粒体蛋白抗体 0.2ml
Arg(Human Arginase) ELISA Kit 人精 96T
RBM26 RNA结合蛋白26抗体 0.2ml
CGK2 cGMP依赖性蛋白激2抗体 0.1ml
HCV-Core 丙型肝炎病毒-C区抗体Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗人IgG 0.1ml
G3PP 转运蛋白G3PP抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALDOB 缩2抗体 0.1ml
KT3 tag/HRP 辣根过氧化物标记KT3 tag标签抗体IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG/PE PE标记的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Smad2/3 /FITC 荧光标记Smad 2/3抗体IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
DNA扩增试剂盒48T大鼠核糖核T2（RNASET2）elisa检测试剂盒
大鼠末端运动神经元生存蛋白1（SMN1）elisa检测试剂盒
小鼠性成纤维生长因子（AFGF/FGF1）elisa检测试剂盒
小鼠α1抗胰蛋白（α1-AT）elisa检测试剂盒
小鼠干扰调节因子5（IRF5）elisa检测试剂盒
大鼠前列腺内过氧化物1（PTGS1）elisa检测试剂盒
大鼠蛋白质二硫键异构（PDI）elisa检测试剂盒
大鼠呼吸道合胞病IgA（RSV-IgA） elisa检测试剂盒
大鼠基质衍生因子2蛋白1（SDF2L1）elisa检测试剂盒
大鼠结构特异性识别蛋白1（SSRP1）elisa检测试剂盒
小鼠平足蛋白（PDPN）elisa检测试剂盒
小鼠胞外超氧化物歧化3（SOD3）elisa检测试剂盒
小鼠原钙粘蛋白15（PCDH15）elisa检测试剂盒
大鼠卵泡抑样蛋白1（FSTL1）elisa检测试剂盒
大鼠前动力蛋白2（PK2）elisa检测试剂盒
