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注意事项
1.公司产品仅用于科研整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
参数规格:
产品名称:棉花黄萎病菌PCR试剂盒
产品货号:FS-P013408
产品规格: 50次
产品分类:纯化试剂盒
产品运输:低温运输
实验过程:
一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 |
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
HRH4/GPCR105/FITC 荧光标记组织胺H4受体抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Synapsin II /FITC 荧光标记神经突触2抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADK/AK 腺苷激抗体 0.1ml
Rabbit Goat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗羊IgG 0.1ml
GABRA4 G基丁A型受体α4/GABAA Rα4抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgM/HRP 辣根过氧化物标记的兔抗鸡IgM 0.1ml
Synapsin II /FITC 荧光标记神经突触2抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Q-Ab(Human Q fever antibody) ELISA Kit 人抗Q热抗体Multi-class antibodies: 48T
IL-17 白介-17抗体(人)Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LYL1 细胞性白血病相关序列1抗体 0.2ml
LDLR(Human very low density lipoprotein receptor) ELISA Kit 人低密度脂蛋白受体 96T
RAB2 ras癌基因家族Rab2抗体 0.2ml
Crk p38 Crk p38抗体 0.2ml
IL-17 白介-17抗体(人)Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse IgM/RBITC 罗丹明标记的兔抗小鼠IgM 0.3ml
GIDRP88 生长抑制和分化相关蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANP 心钠抗体 0.1ml
IL-22BP/IL22RA2/FITC 荧光标记白介22受体结合蛋白抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗人IgG 0.1ml
RelB /FITC 荧光标记核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
棉花黄萎病菌PCR试剂盒榆耳种属: Gloeostereum│incarnatum提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0091生长条件: 25℃存储条件: 液氮超低温冻结法;矿物油法
假丝酵母种属: Candida│sp.提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0013生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
变灰链霉菌种属: Streptomyces│cinereus提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: yes应用领域: 模式菌株培养基: 0039生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
米根霉种属: Rhizopus│oryzae提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0014生长条件: 25℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
协同激分子受体(CMR)ELISA试剂盒 分析标准品5-氨基邻甲酚 97%伊曲康唑(标准品)
小表皮粘蛋白(SBEM)ELISA试剂盒聚乙烯硫盐 平均分子量 Mw ~170,0002-氨基-4-二基 97%氟康唑
小而密低密度脂蛋白(sLDL)ELISA试剂盒5-酰核糖-1-焦钠盐 80%2-氨基-2'-甲基二基 97%氟康唑(标准品)
小扁豆结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒菊酯 分析标准品AE-活性酯 97%盐齐拉西酮
小扁豆结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒无亚硫 CP,98.0%二硫化二并噻唑 98%盐齐拉西酮(标准品)
小扁豆结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA试剂盒 Standard for GC, ≥99.5% (GC)5-硝基-2-酚 98%草依地普仑/草艾司西
相扑结合UBC9(UBE2I/UBC9/UBCE9)ELISA试剂盒仲班 99%2-氧基 99%草依地普仑/草艾司普兰(标准品)
腺相关病(AAV)ELISA试剂盒菲啰 97%4-氨基二 98%消旋卡多曲
腺苷脱氨(ADA)ELISA试剂盒P1,P5-二(腺苷5′)五五钠盐 96%1,8-二氨基萘 97%消旋卡多曲(标准品)
腺苷环化1(AC-1)ELISA试剂盒一甲乙酯 99%1,5-二硝基萘 97%乙酰螺旋霉
腺苷三结合盒转运体G2(ABCG2)ELISA试剂盒1-(4-吡啶基)哌 97%盐联 AR,99.0%尼罗替尼
腺苷三结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒邻-(2,3,4,5,6-五氟苄基)羟盐盐 99%,用于GC盐乙二 AR,99%尼罗替尼(标准品)
腺苷三结合盒转运蛋白G2(ABCG2)ELISA试剂盒邻-(2,3,4,5,6-五氟苄基)羟盐盐 98%盐乙二 CP,98.0%螺旋霉
线粒体肽蛋氨亚砜还原(MSRA)ELISA试剂盒DL-3-基-2-羟 ≥98.0%赤 AR,98.5%螺旋霉(标准品)
衔接蛋白活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒DL(±)-3-氨基-3-基 98%黄 AR(剧品)螺内酯
酰基化饥饿(AG)ELISA试剂盒2-基丁酰 98%黄 CP(剧品)螺内酯(标准品)