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参数规格:
产品名称:双歧杆菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒
产品货号:FS-P013557
产品规格:50次
产品分类:纯化试剂盒
产品运输:低温运输
实验过程:
一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 |
注意事项
1.公司产品仅用于科研整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
Human flagellin ELISA Kit 人鞭毛蛋白Multi-class antibodies: 48T
Smoothened/SMOH 跨膜蛋白Smoothened抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/Cy7 Cy7标记的羊抗小鼠IgM 0.1ml
(Mouse ovarian cancer marker-CA125) ELISA Kit 小鼠卵巢癌标志物CA125 96T
NSF N-乙基顺丁烯二酰亚胺敏感融合蛋白抗体 0.2ml
phospho-Bim (Ser55) 磷化细胞死亡调解子抗体 0.1ml
Smoothened/SMOH 跨膜蛋白Smoothened抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
TR(Human Testoterone recepter) ELISA Kit 人睾酮受体Multi-class antibodies: 48T
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗体Multi-class antibodies: 1ml
Rhesus antibody Rh Lambda Light Chain λ轻链抗体 0.1ml
FN ELISA Kit 大鼠纤连蛋白 96T
PROSAAS 枯草溶菌转化1抑制剂抗体 0.2ml
CCDC16 卷曲螺旋结构域蛋白16抗体 0.2ml
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗体Multi-class antibodies: 1ml
Donkey rabbit IgG/RBITC 罗丹明标记的驴抗兔IgG 0.1ml
GJA8 间隙连结蛋白50/白内障相关蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB10 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体 0.1ml
TRT/TERT/PE 荧光PE标记端粒抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM/HRP 辣根过氧化物标记的兔抗猴IgM 0.1ml
Phospho-PKC gamma (Thr674) /FITC 荧光标记磷化蛋白激C亚型G抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
双歧杆菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒小单孢菌种属: Micromonospora│sp.分离基物: 土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 除草剂活性培养基: 0305生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
O1群霍乱弧菌种属: Vibrio│cholerae O1提供形式: 冻干物安全等级: 3模式菌株: no应用领域: 地方株 O1/classical 小川(ogawa)培养基: CM0116生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
玉龙小单孢菌种属: Micromonospora│yulongensis提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: yes应用领域: 模式菌株培养基: 0011生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
大肠埃希氏菌种属: Escherichia│coli提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 15生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
SPARC相关模块化钙结合蛋白1(SMOC1)ELISA试剂盒(R)-4-苄基-2-恶唑酮 99%2-甲氧基萘 98%6-(γ,γ-二甲基烯基氨基)核苷(植物级)
SHC转化蛋白1(SHC1)ELISA试剂盒乙酰氨基二二乙酯 98%棕榈棕榈酯 95%6-甲基(>98%,BR)
SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒对羟基酮 98%2-并噁唑啉酮 98%7-氨基头孢
Salusin Beta(Salusin β)ELISA试剂盒(S)-4-异基-2-恶唑酮 98%N-甲基吡咯酮 AR,99.0%8-羟基喹哪啶(>98%,BR)
Salusin Alpha(Salusin α)ELISA试剂盒(R)-4-异基-2-恶唑酮 98%科里内酯 98%9,10-二溴蒽(>98%,BR)
SAALDL复合物(SAALDL)ELISA试剂盒米氏 98%Selectfluor® 氟试剂 95%双酚芴(>98%,BR)
S100钙结合蛋白P(S100P)ELISA试剂盒D-氨 98%(三氟甲基)基硅 96%9-氨基吖啶单盐单合物(>98%,BS)
S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)ELISA试剂盒L-脯氨 97%3'-氨基乙酮 97%9-咔唑乙(>95%,BR)
S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)ELISA试剂盒(R)-4-基-2-恶唑酮 98%2-氨基二甲酮 98%乙酰基乙酰(>99%,BR)
S100钙结合蛋白A8/A9复合物(S100A8/A9)ELISA试剂盒L-氨 98%2-溴乙酮 98%溴化乙酰(>98%,BR)
S100钙结合蛋白A6/钙粒蛋白A(S100A6)ELISA试剂盒L-甘氨 98%3-溴代乙酮 98%酮肟(>98%,BR)
S100钙结合蛋白A12/钙粒蛋白C(S100A12)ELISA试剂盒(S)-4-基-2-恶唑酮 98%2-代乙酮 98%(剧品)化乙酰(>98%,BR)
S100钙结合蛋白A11(S100A11)ELISA试剂盒D-甘氨 99%2,4-二羟基乙酮 99%性蓝29(>50%,Ind Grade)
S-100蛋白(S-100)ELISA试剂盒D-脯氨 98%3'-羟基乙酮 98%性蓝40(>50%,BS)
S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒L-缬氨 97%4-羟基二甲酮 98%性品红6B(>50%,BS)
S-100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒D-缬氨 98%2,4,6-三羟基乙酮 一合物 98%吖啶盐盐(>98%,BS)
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。