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封闭血清适用于免疫组化或者免疫荧光实验中样本的封闭。可以封闭待检样本中与蛋白质非特异性结合的位点,另外还可以封闭样品中内源性的Fc片段结合位点,阻断抗体与样品中的Fc受体结合,从而降低背景,减少假阳性。在选择封闭血清时,要注意封闭用血清中不能含有目标蛋白,且与一抗来源不同,可用与二抗相同来源的封闭血清。
使用时,用PBS(0.01mol/LpH7.2-7.4)将封闭血清原液稀释10或20倍,配成10%或者5%的工作液,直接滴加在组织切片或者细胞凃片上,37℃孵育10-30分钟,清除血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗工作液,37℃孵育1-2h或4℃过夜。