革兰染色液使用说明书

【产品名称】通用名称：革兰染色液

            产品型号：JRBGL4S

【包装规格】每种染色液的包装规格为每瓶50 ml、100ml、250ml或500ml，整组染色液的包装规格为：4×50ml、4×100ml、4×250ml或4×500ml。

【预期用途】用于细菌或真菌的涂片染色。

【检测原理】革兰阳性菌的细胞壁有一层比革兰阴性菌厚的肽聚糖，能与结晶紫紧密结合，不容易被脱色液洗掉，在此基础上形成了革兰染色液试剂。

【主要组成成分】

【储存条件及有效期】

1、原包装未开封染色液的有效期为12个月，在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。

2、储存条件：本试剂应贮存在相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的10℃～30℃常温环境。

3、生产日期和失效日期：详见外包装标签。

【样本要求】待检标本应为菌株或有菌株的标本。

【检验方法】

1.涂片

取一洁净载玻片，滴一小滴生理盐水于玻片中央，按无菌操作要求，先用接种环，挑取少量某菌培养物于玻片中央水滴中，涂布均匀。要求涂片薄且均匀，使其自然干燥。

2.固定

菌液涂片干燥后通过火焰 1-2 次即可，不可过热，以载玻片不烫手为宜。

3.染色

一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：

（1）初染：滴加结晶紫染色液（A液）覆盖玻片涂布区，染色1分钟，水洗。

（2）媒染：滴加（B液）碘液后染色1分钟，水洗。

（3）脱色：甩净载玻片上水分，倾斜玻片，并衬以白纸，用95%乙醇溶液（C液）滴洗至无紫色褪下时为宜，时间20-60s。

（4）复染：滴加蕃红染色液（D液）后，染色1-2分钟，水洗。

（5）吸干或在空气中凉干后，油镜镜检。

【检验结果的解释】在显微镜下观察染色结果：

1、在显微镜下观察到紫色或深紫蓝色菌落为革兰染色阳性菌。  

2、在显微镜下观察到红色或粉红色菌落为革兰染色阴性菌。 

【检验方法的局限性】有些细菌有染色嗜变性，不一定*是染色原因，应根据菌体形态加以确定。

【注意事项】

1、该染色液仅用于体外诊断。      

2、涂片厚薄要均匀，自然干燥后再加热固定。

3、酒精脱色过度或复染的时间不能太长，阳性菌可被误染为阴性菌；酒精脱色不够，阴性菌可被误染为阳性菌。

4、所用标本应视为具有传染性物质。

【参考文献】

1、陈天寿.《微生物培养基的制造与应用》.中国农业出版社.1995年版；

2、王钦生等.《实用医学培养基手册》. 人民军医出版社.1999年版； 

3、马绪荣等.《药品微生物学检验手册》.科学出版社.2001年版。