其他品牌 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
货号 | 产品名称 | 规格 |
A-Hc2098 | 2×Taq Plus PCR MasterMix( 含绿染料) | 1ml×5 |
A-Hc2098 | 2×Taq Plus PCR MasterMix( 含绿染料) | 1ml×50 |
A-Hc2098 | 2×Taq Plus PCR MasterMix( 含绿染料) | 1ml×100 |
储存条件:-20℃ 保存。
制品说明:
本产品包含Taq Plus DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。
本产品使用方便快捷,能避免 PCR 操作过程中的污染,使用时只需取适量2×Taq PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。
本产品有含染料和不含染料两种。含染料产品中有两种染料|(绿色染料和黄色染料),在电泳时会分开以监测迁移进度。青色的染料在1%的琼脂糖凝胶中与3-5kb DNA片段的迁移率相同。黄色的染料在1%的琼脂糖凝胶中比引物迁移得快(<50bp)。
产品内容:0.05units/μl Taq Plus DNA Polymerase 、4mM MgCl2、0.4mM dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)
质量控制:经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余 DNA ;能有效地扩增人基因中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
适用范围:
基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测,半定量PCR实验和微量DNA的检测。
DNA扩增和一些有特殊结构的复杂模板和GC含量高(>60%),有二级结构等的扩增:DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定等。PCR产物带A,纯化后可直接用TA克隆。
PCR 反应需要使用哪些试剂和设备?
试剂:
模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;
设备:
PCR仪:用于控制反应温度,保证PCR反应时不同温度环节的严格控制;电泳槽:用于分离PCR扩增产物;核酸提取仪:从组织样本中全自动提取核酸。 这些试剂和设备在PCR分子生物学技术中均是,只有在有序齐全的基础上,才能进行PCR反应并得出准确结果。
PCR相关基础实验:
PCR反应基本步骤一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:
一、变性:
利用高温(93-98℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。
二、退火或称接合,复性:
在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。
三、延伸:
DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。
PCR反应条件优化:
1、变性温度和时间:
保证模板DNA解链是保证整个PCR扩增成功的关键。加热90~95°C, 30~60s,再复杂的DNA 分子也可变性为单链。温度过高或高温持续时间过长,可对Taq酶活性和dNTP分子造成损害。
2、复性温度和时间:
PCR扩增特异性取决于复性过程中引物与模板的结合。复性温度越高,产物特异性越高。复性温度越低,产物特异性越低。需根据引物的Tm值具体设定。
3、延伸温度和时间:
一般位于Taq酶最适作用温度70~75°C之间。引物小于16个核苷酸时,过高的延伸温度不利于引物与模板的结合,可以缓慢升温到70~75°C。延伸反应时间,可根据待扩增片段的长度而定,小于1kb, 1min足够;大于1kb需加长延伸时间。Taq酶可根据1kb/min增加时间。这里需要注意,延伸时间过长可能出现非特异扩增。因此需要设置恰到好处的延伸时间。
4、循环数:
其他参数选定后,PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。理论上说20〜25次循环后,PCR产物的积累即可达到最大值,实际操作中由于每步反应的产率不可能达到100%,因此不管模板浓度是多少,20~30次是比较合理的循环次数。循环次数越多,非特异扩增增加。
公司正在出售的产品:
人乳头瘤病毒11染料法荧光定量PCR试剂盒 | 蛋白精氨甲基转移1ELISA试剂盒 PRMT1免费代测试剂 | 达氏疏螺旋体(达氏包柔螺旋体)染料法荧光定量PCR试剂盒 |
板染料法PCR鉴定试剂盒 | 不耐热肠毒B亚单位ELISA试剂盒 LTB免费代测试剂 | 甲型流感病毒38亚型PCR检测试剂盒价格 |
玉米GA PCR检测试剂盒 | 冠蛋白2AELISA试剂盒 | 绵羊附红细胞体(绵羊嗜血支原体)探针法荧光定量PCR试剂盒 |
鼻疽假单胞菌PCR检测试剂盒 | 层粘连蛋白γ1ELISA试剂盒 | 绵羊附红细胞体(绵羊嗜血支原体)探针法荧光定量PCR试剂盒 |
罗汉果探针法PCR鉴定试剂盒 | 大型中性氨基转运蛋白1ELISA试剂盒 | 巴尔通体通用探针法荧光定量PCR试剂盒 |
禽腺病毒E型染料法荧光定量PCR试剂盒 | 弹性蛋白2BELISA试剂盒 | 猪水泡性口炎病毒PCR检测试剂盒 |
禽致病性大肠杆菌血清型PCR检测试剂盒 | 蛋白酪氨磷ⅣA3ELISA试剂盒 | 牛眼莫拉氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒 |
卵形疟原虫PCR检测试剂盒 | 低分子质量蛋白7/β型蛋白体9ELISA试剂盒 | 罗氏沼虾诺达病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
流行性乙型脑炎病毒PCR检测试剂盒 | 丁型肝炎病毒抗体ELISA试剂盒 | 脑胞内原虫属通用PCR检测试剂盒供应 |
禽疱疹病毒2型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移8ELISA试剂盒 | 绵羊痘病毒PCR检测试剂盒 |
口蹄疫病毒O亚型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 人庚型肝炎病毒抗体(IgM)ELISA试剂盒 | 牛乳头瘤病毒PCR检测试剂盒直销 |
前病毒PCR检测试剂盒 | 人α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)检测试剂盒elisa | 地肤子染料法PCR鉴定试剂盒 |
犬恶丝虫(心丝虫)探针法荧光定量PCR试剂盒 | 2×Taq Plus PCR MasterMix( 含绿染料)人端粒重复序列结合因子1(TERF1)试剂盒ELISA | 疟原虫探针法荧光定量PCR试剂盒 |
李斯特菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人S100钙结合蛋白A8/A9复合物(S100A8/A9)ELISA试剂盒 | 唾液弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
猪布氏杆菌PCR检测试剂盒 | 人吡啶酚(PYD)试剂盒 ELISA | 牛腺病毒型PCR检测试剂盒 |