C43(DE3)感受态细胞

OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cel

产品编码：                      保存条件： -80℃   
产品规格:

C43(DE3)感受态细胞基因型：

F^–ompT hsdSB (rB^- mB^-) gal dcm (DE3)

 

C43(DE3)感受态细胞简要说明：

 OverExpress C43(DE3) 、OverExpress C41(DE3) 两个菌株均起源于 BL21(DE3) ，其优点是可以高效表达毒性蛋白或疏水性蛋白。
OverExpress C41(DE3) 跟BL21(DE3) 的区别在于其基因组含有至少一个未知突变，这个未知突变使其获得了高效表达毒性蛋白（1-5）的能力，此突变位点参与大肠杆菌表达毒性蛋白时的细胞死亡途径；OverExpress C43(DE3) 来源于OverExpress C41(DE3) ，是通过筛选OverExpress C41(DE3)对另一个不同毒性蛋白的抗性菌株获得。
 OverExpress C43(DE3) 菌株具有比OverExpress C41(DE3)更强的表达毒性蛋白和疏水性蛋白的能力，所以说OverExpress C43(DE3) 菌株与BL21(DE3)相比拥有至少两个未知突变，正是这两个未知突变使其获得了更广泛的表达毒性蛋白或疏水性蛋白的能力。

此菌株含有DE3区，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。 High5^TM系列OverExpress C43(DE3) 感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率可达5×10⁸ cfu/μg DNA。
 
 

C43(DE3)感受态细胞操作说明：

1.  取100 μl冰上融化的OverExpress C43(DE3)感受态细胞，加入目的DNA并用指尖轻轻管底混匀(避免用枪吸打)，冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

1.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱培养12小时。

 

C43(DE3)感受态细胞注意事项：

1.   感受态细胞在冰上融化。
2.  混入质粒时应轻柔操作。
3.  转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.  诱导时，IPTG浓度可选（0.1-2mM均可）。

5. 为获得需要量的蛋白，诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。