EHA105农杆菌感受态细胞

EHA105 Chemically Competent Cell

产品编码：                       保存条件： -80℃   
产品规格:

                

EHA105农杆菌感受态细胞基因型：
C58 (rif ^R) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) (strep^R) Succinamopine

EHA105农杆菌感受态细胞简要说明：
 EHA105菌株由EHA105菌株改造而来，为C58型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) ，此质粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移）。
pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)型Ti质粒含有筛选标签：strep，赋予EHA105菌株链霉素抗性，适用于水稻、烟草等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率可达10⁴cfu/μg。

EHA105农杆菌感受态细胞操作说明：

1.  取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。
2.  每100μl感受态加1ug（体积不大于10ul）质粒DNA，用手管底混匀，依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、28℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3.  加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。

4. 6000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天（当平板只含有50ug/ml kan 时，28℃培养48h即可；平板中同时加入50ug/ml kan，20ug/ml rif 时，需28℃培养60h；如果使用的平板含有50ug/ml rif 则需要28℃培养72-90h）。

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