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上海市所在地
HT29-LUC(人结肠癌细胞-荧光素酶标记(STR鉴定正确))
面议MCF-7-LUC-EGFP(人乳腺癌细胞-荧光素酶标记-绿色荧光蛋白(STR鉴定正确))
面议NCI-H1975-LUC-EGFP(人肺腺癌细胞-荧光素酶标记-绿色荧光蛋白(STR鉴定正确))
面议293T-LUC-EGFP(人胚肾细胞-荧光素酶标记-绿色荧光蛋白(STR鉴定正确))
面议MG63-LUC(人骨肉瘤细胞-荧光素酶标记(STR鉴定正确))
面议MHCC-97H-LUC-EGFP(人高转移性肝癌细胞-荧光素酶标记-绿色荧光蛋白(STR鉴定正确))
面议U87-MG-LUC-EGFP(人脑星形胶质母细胞瘤-荧光素酶标记-绿色荧光蛋白(STR鉴定正确))
面议4T1-LUC-EGFP(小鼠乳腺癌细胞-荧光素酶标记-绿色荧光蛋白)
面议PC3-LUC-BSD(人前列腺癌细胞-荧光素酶标记(STR鉴定正确))
面议CNE2-LUC-EGFP(人鼻咽癌细胞-荧光素酶标记-绿色荧光蛋白(STR鉴定正确))
面议RKO-LUC-EGFP(人结肠腺癌细胞-荧光素酶标记-绿色荧光标记(STR鉴定正确))
面议MKN-28-LUC-EGFP(人胃癌细胞-荧光素酶标记-绿色荧光蛋白(STR鉴定正确))
面议一、细胞基本属性 | ||||
细胞名称 | hela人子宫颈癌细胞(STR鉴定正确) | |||
细胞别称 | HELA; Hela; He La; He-La; Henrietta Lacks cells; Helacyton gartleri | |||
种属来源 | 人 | |||
年龄性别 | 31岁,女 | |||
组织来源 | 宫颈腺癌 | |||
生长特性 | 贴壁生长 | |||
细胞形态 | 上皮细胞样 | |||
细胞代数 | 10代以内 | |||
背景简介 | Hela细胞是个来自人组织和连续培养维持非整倍体上皮样细胞系。Hela细胞是由G·D·Gey等在1951年从31岁女性黑人的宫颈癌建立。经原始组织切片样品的重新观察,Jones等将其诊断为腺癌。已知该细胞系含有人乳头状瘤病毒18序列,需在2级生物安全防护台操作。Hela细胞角蛋白阳性,p53表达量较低,但表达正常水平的Prb(视网膜母细胞瘤抑制因子)。 | |||
生物安全等级 | 2 | |||
细胞规格 | 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 | |||
支原体检测 | 无 | |||
基因表达情况 | Lysophosphatidylcholine (lyso-PC) induces AP-1 activity and c-jun N-terminal kinase activity (JNK1) by a protein kinase C-independent pathway. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. | |||
保藏机构 | ATCC; CCL-2 ATCC; CRM-CCL-2 ATCC; CRL-7923 BCRC; 60005 BCRJ; 0100 DSMZ; ACC-57 ECACC; ECACC; 93021013;中国医学基础医学研究所细胞资源中心 | |||
培养基 | 90%MEM+10% FBS+1%PS | |||
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ | |||
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 | |||
倍增时间 | ~32-48 hours | |||
STR鉴定位点 | Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:18,21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18; | |||
STR鉴定位点图 | ||||
细胞货期 | 现货,1周左右 | |||
发货方式 | 复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 | |||
供应限制 | 于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 | |||
特别说明 | 以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 | |||
二、细胞培养操作 | ||||
收货方式 | T25瓶 | 冻存管 | ||
初步平衡 | 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,放37度培养箱内静置培养2-4h,以便稳定细胞状态 | 无须平衡,直接放入-80冰箱(不超过一周)或者液氮罐保存,建议尽早复苏 | ||
传代密度 | 细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养 | 第二天换液并检查细胞密度 | ||
传代比例 | 传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 | 一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶 | ||
传代方法 | a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 | 将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 | ||
注意事项 | 1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的培养基来培养细胞。 2.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。 | 1.收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存; 2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。 | ||
到货须知 | 1.收到细胞后,及时拍照记录有无漏液、浑浊或瓶身破损现象。 2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。 3.由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 4. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。 | |||
备注:客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以技术服务电话: 按 2,我们随时给予解答。 | ||||
三、细胞冻存操作 | ||||
冻存液配方 | 无血清冻存液,液氮储存 | |||
细胞密度 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例 | |||
冻存方法 | a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 | |||
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 | |||
四、售后服务 | ||||
重发标准 | 1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发; 2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发; 3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发; 4.常温发货的细胞静置 2 小时后,干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发; 5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,出现污染,经核实后,重发; 6.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发; 7.视具体情况而定。 | |||
不予重发 | 1.客户操作造成细胞污染,不重发; 2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发; 3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发; 4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片,不重发; 5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发; 6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发; 7.视具体情况而定。 |