效率与合规之间的平衡——在生物制药生产中，DNA 去除的巧妙解决方案

　　默克限制性内切酶典型应用：

　　• 为达到药品监管当局对生物制品不断提高的核酸残量限制而提供的解决方案

　　• 大大降低核酸物质对目标分离物纯化及生物活性的干扰，终有效提高生化药物在纯化工艺过程中的产品收率

　　1.产品简介：

　　是用于生化药物生产的外源性核酸酶。其分子量为 30 KD，等电点为 pH 6.85。

　　Benzonase® 在 pH 6—10, 0—42℃条件下能有效工作。使用时必须有 Mg²+(1-2mM)存在，以作为激活剂(详细 操作条件参后)。此产品供应时以 20mM Tris-HCI(pH 8.0)，2mM MgCI2，20mM NaCI 作为缓冲液，50%(v/v) 甘油作为稳定剂，分成 10 万，50 万酶活性包装单位。

　　同时每批的一级纯 Benzonase®(Purity I，99%)核酸内切酶的内毒素含量都进行独立严格测定，以满足生化制药的生产需要。其整体内毒素含量都小于 0.25 EU per 1.000 units(LAL test)。

　　2. 监管信息：

　　美国食品药物管理局(FDA)规章条例被视为生物制药领域严格的质量标准。但由于过程分离原料直接应用于有效成分的纯化，而不会残留在终的产品中，因此 FDA 没有明确的规章来监控诸如Benzonase® 核酸内切酶这样的应用于纯化领域的原料。但是默克对产品的安全性重视。在cGMP 条件下生产，而且在 FDA 拥有 DMF 文件(II 类，注册号 BBMF5403)。另外，默克通过 DIN ISO9001 和 14001 质量管理体系认证。

　　• 可降解各种形态的 DNA 和 RNA(包括：单链，双链，环状以及环状超螺旋型)

　　• 广泛的可操作条件(可在通常纯化工艺条件下配合使用)

　　• 高效的核酸酶活性，活性高达(>1.0 x 106 Units/mgprotein*)

　　• 被广泛应用于生物制药行业的各领域(疫苗类制品，基因治疗法中病毒载体的生产，治疗性蛋白(如：包涵体的处理)，真核生物系统表达的单克隆抗体)

　　• 无蛋白酶活性(基于现有的蛋白酶测定方法) • Under standard conditions 1ng (ca. 1U) of Benzonase® cleaves Ca. 1.5μg of native DNA per minute resulting in acid soluble fragments

　　• 为确保 FDA 对生物重组类产品中核酸残留量的严格 限制(核酸含量 <100pg per dose)，利用Benzonase® 核酸内切酶来去除产品中的核酸物质。

　　• 降低细胞破碎时被处理样品的粘度，以提高后续纯化过程的效率和终产品收率。

　　• 用于包涵体的处理，以提高复性后可溶性包涵体的收率。

　　• 利用 Benzonase® 核酸酶对 2D—凝胶电泳的样品进行上样前处理，消除样品中核酸物质对蛋白的影响，终明显提高 2D 电泳的分辨率。

　　默克限制性内切酶包装单位 订货号

　　Benzonase® 非限制性核酸内切酶一级纯(purity grade Ⅰ 99%)250 U/ul， for Biotechnology

　　100, 000 U/vial 1.01695.0001

　　500, 000 U/vial 1.01697.0001

　　5, 000, 000 U/vial 1.01697.0010

　　Benzonase® 非限制性核酸内切酶二级纯(purity grade Ⅱ 90%)250 U/ul， for Biotechnology

　　100, 000 U/vial 1.01654.0001

　　500, 000 U/vial 1.01656.0001

　　Benzonase® 非限制性核酸内切酶 ELISA kit II 检测试剂盒for the immunological detection of Benzonase® endonuclease

　　5 plates(8x12)plus reagents 1.01681.0001