荧光探针法PCR试剂盒-志贺氏菌(SH)荧光探针法PCR试剂盒-上海晅科生物科技有限公司

详细介绍

　　荧光探针可以检测到非常微小的PCR产物，因此具有高灵敏度，是自然界中一些微生物、病毒和癌症等疾病诊断的理想技术。荧光探针可以特异性地检测目标序列，检测结果准确，可克服其他传统PCR技术的特异性问题。志贺氏菌（SH）荧光探针法PCR试剂盒目前已实现PCR自动化分析，可节省实验时间和人力成本，提高实验效率。

　　【储存条件及有效期】

　　-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融少于 7 次，有效期 12 个月。

　　【适用仪器】

　　ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

　　说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。

　　1.1 结果判断

　　阳性：检测通道 Ct 值≤35.0，且曲线有明显的指数增长曲线。

　　可疑：检测通道 Ct 值>35.0，且出现典型扩增曲线的样本建议重复试验，重复试验结果出现 Ct 值≤35.0 和典型扩增曲线者为阳性，否则为阴性。

　　阴性：样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。

　　2. 检测方法的局限性

　　a. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；

　　b. 样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；

　　c. 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；

　　d. 病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；

　　e. 不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；

　　f. 试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；

　　g. 本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。

　　3. 质控标准

　　阴性质控品：无明显扩增曲线或无 Ct 值显示；

　　阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32；以上条件应同时满足，否则实验视为无效。

　　1.1 DNA 提取

　　1) 对上述处理好的标本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL 核酸提取液)， 100℃恒温处理 10min，13,000 rpm 离心 5min，取上清液转移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；

　　2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生产的DNA 提取试剂盒(离心柱提取法)，请严格按照试剂盒说明书进行操作。

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