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要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。以下介绍了几种行的测量和计算柱效值的方法。
提高液相色谱柱柱效的方法
(1)降低移动相的流速,但会使分析时间延长。
(2)减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。
(3)减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。
(4)选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。
(5)适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分离度也随之降低。
(6)尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。
从以上介绍可看出,在色谱分析过程中,各种因素是互相联系和制约的。只有通过对柱效值的跟踪测算,对自己分析方法不断的研究和实践,才能找到的工作条件。
室温的变化会影响HPLC结果的重现性,无论是单一系统的重复运行间、实验室内的不同系统间,还是不同实验室之间,都可能导致结果的不稳定。柱温变化会造成保留时间漂移、峰形改变、增加得到精密结果的难度。Waters提供2种类型的柱温箱(均是*的微处理器控制方式),加热/冷却型和加热型。加热/冷却型的温度范围是4℃到65℃,加热型的控温范围是室温上5℃至65℃。这两种柱温箱的尺寸均可以放入30厘米的色谱柱(并包括在线保护柱)。通过可在滑轨上自由定位的夹子固定色谱柱。改进的连接管路和漏液托盘增强其功能和安全性。在柱温箱的底部为切换阀预留了空间。