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Anti-Clostridium difficile Toxin A (Chicken lgY)

艰难梭菌毒素/艰难梭菌是引致抗生素相关性腹泻和伪膜性结肠炎的病原体。它产生两种主要毒素，毒素 A 和毒素 B，毒素 A 和毒素 B 都通过氨酸残基的葡萄糖基化使小 GTP 酶(如 Rho、 Rac 和 Cdc42)失活。这些 gTP 酶的抑制导致信号转导级联的停止，从而导致细胞骨架解聚，某些应激激活蛋白激酶的基因转录，磷脂酰肌醇4,5二磷酸的合成下降，以及细胞极性可能丧失。细胞骨架结构的丧失导致细胞舍入。一些艰难梭菌菌株也产生二元 ADP- 核糖基化毒素(CDT) ，修饰肌动蛋白。来自艰难梭菌的毒素 a 毒素被称为肠毒素，分子量为300kDa，等电点 pl 为5.3。毒素 A 已被证明在上皮细胞表面碳水化合物上有结合位点，并引起白细胞介素8的诱导。李斯特提供的艰难梭菌毒素 A 是从天然菌株中高度纯化的。产品 # 152艰难梭菌毒素 A 在 Tris 缓冲液中冻干。强烈建议测试一系列毒素浓度的细胞毒性，因为每种细胞对毒素 A 的敏感性不同。来自艰难梭菌的毒素 B 毒素 B，称为细胞毒素，分子量为270 kDa，pl 为4.1。在组织培养中，毒素 B 是一种对哺乳动物细胞有效的细胞毒素，在细胞舍入测定中，毒素 B 的细胞毒性至少是毒素 A 的1000倍。毒素 B 可以阻断5-羟色胺的释放，并刺激磷脂酶 C 和 d 的产生。由于毒素 B 能够影响细胞骨架的解聚，已经证明它能够抑制双相肌肉收缩。毒素 B 具有高度的细胞毒性，对该毒素最敏感的检测方法是上皮细胞毒性试验。以细胞为基础的检测对于确定住院病人腹泻病的病因非常重要。这些毒素中和试验(TNA)与特异性抗体相当精确。如果将特异性抗毒素 B 抗体与粪便样品混合，保护细胞培养免受没有该抗体的毒性作用，则确定患者体内存在艰难梭菌毒素 B。名单实验室的鸡肉抗 C。艰难毒素 B 抗体已被证明是有用的这些 TNA 细胞为基础的测定。李斯特提供的艰难梭菌毒素 B 是从天然菌株中高度纯化并作为液体提供的。产品 # 155L 艰难梭菌毒素 B，液体，在 Tris 缓冲溶液中提供。这种毒素溶液很容易使用，并且在某些应用中更加方便。同样，测试一系列毒素浓度的细胞毒性很重要，因为每种细胞对毒素 B 的敏感性不同。类毒素/艰难梭菌毒素 a 和毒素 b 的类毒素都是由纯化的毒素经甲醛灭活而制成的。所有制剂都经过细胞毒性测试，结果在每批货物提供的 C-A 中。产品 # 153毒素 A 艰难梭菌类毒素在氨酸缓冲液中冻干。产品 # 154毒素 B 艰难梭菌类毒素在氨酸缓冲液中冻干。氨酸脱氢酶(cdgDH)氨酸脱氢酶(cdgDH)是艰难梭菌的天然菌株产生的主要抗原。对于感染早期的诊断，cdGDH 比毒素 A 或毒素 B 更容易被 ELISA 检测到，并且是开发检测试剂盒的可行候选者。List Labs 还提供鸡抗 cdGDH 抗体，产品 # 756。来自李斯特提供的艰难梭菌的氨酸脱氢酶是从本地菌株中高度纯化并作为液体提供的。来自艰难梭菌的产品 # 159氨酸脱氢酶在 D-PBS 缓冲液中进行冻干。抗体列表实验室提供了几种针对艰难梭菌产物产生的抗体，包括针对艰难梭菌毒素 A 的山羊抗血清，以及针对艰难梭菌毒素 A 和毒素 B 的亲和纯化的鸡 IgY。还提供了针对艰难梭菌 GDH 和艰难梭菌二元毒素 A 的亲和纯化的鸡 IgY。反 C。艰难二元毒素 B 鸡 IgY 既有物素化作用也有非物素化作用。二元毒素 B 亚单位的抗体可用于捕获和检测二元毒素。抗艰难梭菌产物的抗体可用于免疫印迹、 ELISA 和夹心 ELISA。这些产品可能适用于诊断，并对传染病研究有相当大的兴趣。产品 # 752抗 C。艰难毒素 A 山羊抗血清作为冻干粉末提供。产品 # 753反 C。艰难毒素 A 亲和纯化的鸡 IgY 作为液体在 PBS 缓冲液中提供。产品 # 754反 C。艰难毒素 B 亲和纯化的鸡 IgY 作为液体在 PBS 缓冲液中提供。产品 # 756抗 C。难氨酸脱氢酶亲和纯化的鸡 IgY 在 PBS 缓冲液中作为液体提供。产品 # 757反 C。艰难二元毒素 A 亚基亲和纯化的鸡 IgY 作为液体在 PBS 缓冲液中提供。产品 # 758反 C。艰难二元毒素 B 亚基亲和纯化的鸡 IgY 在 PBS 缓冲液中作为液体提供。产品 # 759反 C。艰难二元毒素 B 亚基鸡 IgY，物素化，作为液体在 PBS 缓冲液中提供。

科学报告鉴定出 ADS024，一种具有直接杀死艰难梭菌和毒素降解生物活性的新特征菌株。 O’Donnell，MM; Hegarty，jW; Healy，b; Schulz，S; Walsh，CJ; Hill，c; Ross，RP; Rea，MC; Farquhar，R; Chesnel，L; 艰难梭菌感染(CDI)仍然是全球重大的健康威胁。艰难梭菌是一种机会性的毒性病原体，它利用肠道微生物群的紊乱生长，产生从腹泻到伪膜性结肠炎等症状和体征。用于治疗艰难梭菌感染的抗生素通常是广谱的，可以进一步破坏共生肠道微生物群，使患者易于复发艰难梭菌感染。在抗生素治疗完成后，继续抑制艰难梭菌生长的治疗方案的需求日益增加。降解艰难梭菌毒素同时对肠道细菌的附带影响最小的治疗也需要防止复发。能够产生一系列抗菌化合物、蛋白酶和其他生物活性代谢物的治疗性细菌是在症状消退后预防 CDI 复发的潜在有力工具。在这里，我们描述了 ADS024(以前的 ART24)的鉴定和初始角色塑造，这是一种新的治疗细菌，可以在体外杀死艰难梭菌，对其他共生细菌的影响有限。除了直接杀死艰难梭菌，ADS024还能产生能够降解艰难梭菌毒素的蛋白酶，这种蛋白酶是与大多数 CDI 病例相关的症状的驱动因素。ADS024作为一种单菌株活性生物治疗产品正在临床开发中，用于预防 CDI 复发，这个初始数据集支持进一步的研究，旨在在未来的人类临床试验中评估 ADS024。

CellTFPI 是来自强毒力进化枝2艰难梭菌 J; Yang，Q; Zhang，X; Zhang，Y; Wan，L; Chan，X; Zhou，Y; He，L; Li，D; Jin，D; zen，Y; Huang，J; Li，Y; Tao，L; 强毒力进化枝2艰难梭菌的出现与严重症状有关，占全球感染的 > 20% 。TcdB 是艰难梭菌的主要毒力因子，而进化枝2菌株仅表达两种使用不同于经典 TcdB 的未知受体的 TcdB 变体(TcdB2和 TcdB4)。在这里，我们进行了 CRISPR/Cas9筛选 TcdB4和鉴定组织因子途径抑制剂(TFPI)作为其受体。使用低温电镜，我们确定了全长 TcdB4与 TFPI 的复杂结构，为 TcdB 定义了一个共同的受体结合区域。该区域内的残基变异将主要的 TcdB 变异分为两类: 一类识别卷曲(FZD) ，另一类识别 TFPI。TFPI 在肠腺中高度表达，重组 TFPI 对结肠上皮具有保护作用。这些发现确定了 TFPI 作为来自艰难进化枝2 C 的 TcdB 的结肠隐窝受体，并揭示了 CDI 发病的新机制。

方法在使用下一代 DNA 测序的单结构域抗体的分子生物学简易亲和力成熟中，Lowden，MJ; van Faassen，H; Raphael，S; Ryan，S; Hussack，G; Henry，KA; 结合亲和力是抗体功能的主要决定因素之一。在这里，我们提供了一个简单和快速亲和力成熟的单结构域抗体(sdAbs)使用串联噬菌体展示选择和下一代 DNA 测序的方案。使用随机或位点饱和诱变使针对艰难梭菌毒素 A (A26.8)的模型驼科植物 sdAb 的序列多样化，并克隆到基因3上游的噬菌体载体中。所得到的噬菌体展示的 sdAb 文库对艰难梭菌毒素 A 进行平移，并使用 Illumina MiSeq 测序对平移输出进行询问。通过生物信息学分析，我们能够鉴定 sdAb 互补决定区域中的个体亲和力增强氨基酸取代，当结合时，导致亲和力改善约10倍。这种方法的优点是不需要对单个克隆进行广泛的筛选和角色塑造，也不需要关于 sdAb 的机制的结构信息: 抗原相互作用。

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