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稀释后，珠子悬浮液在2°C至25°C的温度下稳定8小时，以防光线照射。4S.B3单克隆抗体特异性结合干扰素-γ（IFN-γ）。用于产生该杂交瘤的免疫原是从用金黄色葡萄球菌刺激的人PBMC的上清液获得的部分纯化的人IFN-γ。干扰素-γ（IFN-γ）是一种有效的多功能细胞因子，由几种活化细胞类型产生，包括NK，NKT，CD4 +TCRαβ+，CD8 +TCRαβ+和TCRγδ+ T细胞。IFN-γ通过与由IFN-γRα（CD119）和IFN-γRβ亚基组成的高亲和力IFN-γ受体复合物的特异性结合发挥其生物学作用。除了其抗病毒作用外，IFN-γ还上调许多淋巴细胞功能，包括巨噬细胞，NK细胞和嗜中性粒细胞的抗微生物和抗肿瘤反应。此外，IFN-γ可对增殖，分化产生强烈的调节作用，和B细胞和T细胞亚群的效应反应。这些影响可能涉及IFN-γ通过抗原呈递细胞增强MHC I类和II类表达的能力以及对B细胞和T细胞本身的直接作用。人IFN-γ是含有143个氨基酸残基的14-18kDa糖蛋白。

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克隆4S.B3也与狒狒的外周血CD3 +淋巴细胞的细胞质成分交叉反应，并且在莫能菌素存在下用佛波醇肉豆蔻酸乙酯（PMA）和Ca ++离子载体（A23187）处理5小时后，与恒河猴和食蟹猴交叉反应。CD3 +细胞中4S.B3的染色模式与来自正常人供体的外周血T淋巴细胞观察到的相似。该试剂可用于流式细胞术分析的细胞内免疫荧光染色，以鉴定和计数混合细胞群内的IFN-γ+细胞。

将抗体与BD Horizo​​n TM BV650缀合，BD Horizo​​n TM BV650是BD Horizo​​n TM Brilliant Violet TM染料家族的一部分。该染料是BD Horizo​​n™BV421的串联荧光染料，Ex Max为405nm，受体染料的Em Max为650nm。BD Horizo​​n™BV650可被紫激光激发，并在用于检测APC类染料的滤光片（例如，660/20-nm滤光片）中检测到。由于受体染料的激发和发射特性，将会溢出到APC和AlexaFluor®700探测器中。但是，与任何其他染料组合一样，可以通过补偿来纠正溢出效应。蔡斯，霍夫曼·拉。弱荧光粒子的分辨力：荧光灵敏度的实用测量方法。细胞术。1998年；33:267-279。在bd生物科学数字流式细胞仪上建立基线pmt增益以大化分辨率。bd应用说明。23-8359-00。2005。霍夫曼·拉。流式细胞术的标准化和定量化。作者：Darzynkiewicz，Crisman Ha，Robinson JP，eds.《细胞生物学方法》。爱思唯尔公司；2001；63:300-340。霍夫曼·拉。流式细胞术中的标准化、校准和控制。修订过的。in:Robinson JP，et al，eds.细胞术的当前方案。纽约：约翰威利父子公司；2005年。单元1.3.斯特恩HB。流式细胞仪的噪声、灵敏度和分辨率。细胞术。1992年；13:822-830。伍德JC，霍夫曼RA。流式细胞仪荧光敏感性评价：综述。细胞术。

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