一、质粒DNA准备

1、质粒DNA浓度700ng/ul（注意：①溶解于无菌双蒸水或超纯水；②无内毒素），我用QIAGEN试剂盒除去的内毒素

二、操作流程

1、先将细胞接种到细胞培养板，细胞汇合度在70%左右，再进行转染。

2、复合物制备：将质粒DNA与ZetaLife公司AdvancedDNARNA货号AD600150转染试剂按照1:1（12ug:12ul）关系直接混合，用移液器吹吸10-15次混匀，室温静止10-15分钟。

3、将复合物加入*培养基的细胞培养板，并轻轻混匀，放入培养箱中继续培养（不建议把复合物加入到无血清的培养基里面，我后期会进一步摸索此条件）。

4、转染24小时后对细胞进行正常换液。

5、质粒DNA转染48小时后荧光检测转染效率

三、注意事项：

1本转染方法不适用在下面转染试剂的转染如：lipo3000、,FuGENE6、FuGENEHD、Effectene等；

2细胞培养ZetaLifez7181-500胎牛血清，Gibco的DMEM;

四、美国ZetaLife公司AdvancedDNARNA转染试剂信息：

产品名称

货号

规格

数量

报价

AdvancedDNARNA转染试剂

AD600025

0.25ML

1

1590

AdvancedDNARNA转染试剂

AD600050

0.5

1

2390

AdvancedDNARNA转染试剂

AD600075

0.75

1

2890

AdvancedDNARNA转染试剂

AD600150

1.5ML

1

4490

AdvancedDNARNA转染试剂

AD600500

5ML

1

AdvancedDNARNA转染试剂

AD601000

10ML

1