产品名称：人结肠癌细胞五氟尿嘧啶耐药株LOVO/5-FU 

货号：QS-A004

细胞规格：1-3×10^6细胞量

库存状态：现货

培养液：90% RPMI-1640 +10% FBS +1μg/ml 5-FU

冻存条件：80%*培养液+10%FBS+10%DMSO

运输方式：常温顺丰运输和干冰顺丰运输

货 期：复苏细胞需要1-2周，冻存细胞的需要3-5天（特殊情况会有说明）

质 控：无支原体、无污染、符合标准

研究范围：仅供科研使用

人结肠癌细胞五氟尿嘧啶耐药株LOVO/5-FU

我司是一家专注于生命科学技术领域的高科技企业，在广大用户的帮助和支持下，经过不懈的努力，已成为国内生命科学领域产品的主要供应商之一，一站式采购商城，代理亚洲、欧美国家300多种品牌，200万种以上产品。公司的服务和业务网络遍及全国，在同行获得*。

我司主要经营产品是国内传代细胞和细胞培养相关的生物试剂。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI无外泌体血清等高品质血清。常规液体培养基、胰酶、双抗、无血清冻存液、日本三菱产品、ELISA 试剂盒等产品。售后完善，我们以饱满的热情欢迎新老客户选购！

我司以客户为核心，以产品质量求生存，以售后服务求信誉。我们通过不断改进来提高效率，绝不以牺牲品质作为代价。“诚信、创新、严谨、专业”愿以饱满的热情期待各界朋友携手合作，共创辉煌！

一、客户收到细胞后需注意事项：

1、收到细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。

2、收到细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。由于运输途中的影响，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。

3、收到细胞后，请显微镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的*培养液，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以提高5％去培养。若细胞达到80%左右，血清浓度按照说明书要求进行调配。

4、收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML培养基继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基培养，悬浮细胞后移回培养瓶。

5、将培养瓶置于37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于4℃冰箱，以备不时之需。

6、24小时后，细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般1-3分钟，不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。

7、贴壁细胞，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。    

    二、培养注意事项：

　　1、实验进行前，无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞系的操作。

　　2、无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70% ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。

　　3、工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开的容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。

三、培养的相关知识：

1、在细胞冻存时加入温保护剂，能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO，它是一种渗透性保护剂，可迅速透入细胞，提高胞膜对水的通透性，降低冰点，延缓冻结过程，能使细胞内水分在冻结前透出细胞外，在胞外形成冰晶，减少胞内冰晶，从而减少冰晶对细胞的损伤。

2、细胞的冻存：先将冻存管放入4℃冰箱，约40min。接着置于-20℃冰箱，约30-60min。再接着置于-80℃超低温冰箱中放置，置于液氮罐中长期保存。同时做好冻存记录，在自己的笔记本和冻存记录本上均要记录。细胞的冻存和复苏应遵守慢冻快融的原则。

    我公司所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、治疗。我公司细胞研究中心承诺尽大努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于当时的技术条件，中心不保证其准确性，从文献等处引用的信息本中心未进行核实，仅供参考，使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规，充分考虑可能存在的风险和责任，采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。本公司所有细胞入库之前均经过严格的细胞质量检测和鉴定，所有细胞在出库之前均经过一次严格的质检认证，确保细胞到每一位用户手里都是*状态。我司汇集了一批专业的细胞生物学技术人员，以*的技术支撑产品，欢迎广大用户选购。