ScienCel内皮细胞培养基-无谷氨酰胺1001-NG

英文名：Endothelial Cell Medium – No Glutamine

货号 1001-NG

产地 美国

缩写 ECM-NG

规格 500 ml

用途 科研

包装 瓶装

保存 4℃冰箱

价格：￥2178.00

产品名称：ScienCel内皮细胞培养基-无谷氨酰胺1001-NG

dothelial cell medium – no glutamine (ECM-NG), when used with Endothelial Cell Growth Supplement (ECGS) and FBS is a complete medium designed for optimal growth of normal endothelial cells in vitro. It is a sterile, liquid medium which contains essential and non-essential amino acids, vitamins, organic and inorganic compounds, hormones, growth factors, trace minerals and a low concentration of fetal bovine serum (5%). The medium is HEPES and bicarbonate buffered and has a pH of 7.4 when equilibrated in an incubator with an atmosphere of 5% CO2/95% air. The medium is formulated (quantitatively and qualitatively) to provide an optimally balanced nutritional environment that selectively supports the growth of normal endothelial cells in vitro.

ECM-NG does not contain L-glutamine, an essential amino acid that is unstable in solution at 37°C. ECM-NG should be supplemented with L-glutamine (L-Glu; cat #0813)or stable L-glutamine dipeptide, L-alanyl-l-glutamine (LALG, Cat. #0733). The recommended LALG concentration ranges from 2mM to 10mM but may vary with culture conditions.

ECM-NG consists of 500 ml of basal medium, 25 ml of fetal bovine serum (FBS, Cat. #0025),5 ml of Endothelial Cell Growth Supplement (ECGS,Cat. #1052 and 5 ml of penicillin/streptomycin solution (P/S, Cat. #0503). Note: FBS, ECGS and P/S are not pre-mixed in ECM-NG; they must be added separately to make the complete ECM-NG.

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常见问题问答：

一、血清或培养基产生了颜色或沉淀的问题：

问：我用的是四季青的胎牛血清，56℃30分钟灭活后出现了白色少量絮状沉淀，是不是污染？还能不能 再用？血清的生产日期是2006年7月(现在是2007年6月11日)。

答：应该问题不大。你可以取少量血清放入培养皿中，37℃过夜培养看看就知道是否污染了。血清中沉淀 物的出现有许多种原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。 若您欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。

二、悬浮细胞培养时能否加血清？如果加了会有什么结果？为什么悬浮细胞培养时就不能加血清？

答：血清是细胞培养基中重要的培养成份之一，对细胞生长有广泛影响。在细胞培养时，我们通常会加入 10%的血清。血清的质量对细胞培养的成功至关重要。一般说来，牛血清包括以下成分：生长因子(如激素，白细胞介 素等)，他们可以促进细胞生长；贴附因子，他们可以促进细胞的贴壁，往往只有细胞贴壁才能增值(悬浮培养的细胞 除外)；蛋白质(如血清白蛋白，球蛋白等)，既可以作为营养物质，又可以中止胰酶的作用；还有很多成分不明的物 质。血清还可以起到解毒作用，如脂肪酸、重金属和某些蛋白酶的毒性。血清还可以是细胞免受机械损伤。因此，无 论是贴壁细胞还是悬浮细胞，血清是*的。除非因实验要求无血清培养时，例如：为使细胞同步化时，我们会 采用无血清培养的。单纯的说悬浮细胞培养不能加血清就没有太多的道理了。

三、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理：

答：血清中沉淀物的出现有许多种原因，但普的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成 凝血的蛋白之一)在血渭解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。

若您欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培 养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。

四、如何避免沉淀物的产生？

答：我们建议您在使用血清的时候，注意下列的操作 :

 (1)解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃ 至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。

 (2)解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。

 (3)请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会 因此受到损害，而影响血清的质量。

 (4)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

 (5)若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30 分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇 晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。