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外泌体是一种调节细胞间通讯的纳米级细胞外囊泡。外泌体在纳米医学领域有着巨大的应用潜力。然而,由于需要先进的仪器和昂贵的试剂,分离外泌体的技术受到了限制。在这项研究中,我们开发了一种从培养细胞中分离外泌体的冻干方法。利用布拉德福德(Bradford)测定法对分离出的外泌体的蛋白质含量进行了表征,并利用扫描电子显微镜(SEM)和纳米颗粒追踪分析(NTA)对其大小分布和形状进行了表征。此外,还使用 Western 印迹法评估了 CD63、CD9、CD81、HSP70 和 TSG101 作为重要的外泌体表面标记物。为了确认外泌体的药物递送特性,使用体外模型进行了药物负载和释放研究。外泌体还装载了商业染料(Cy5、Eosin),以评估其药物输送特性。所有这些表征都证实了外泌体的成功分离,其测量值小于 150 nm,具有典型的形状,并表达了已知的外泌体表面蛋白标记。最后,将激酶抑制剂加载到外泌体上,使用MTT和Annexin-PI检测法评估它们对白血病细胞(K562和工程化Ba/F3-BCR-ABL)的抗癌效果。从 MCF-7 细胞中分离出的外泌体上 MUC1 蛋白的表达也表明它们具有完整的潜在诊断特性。