细胞外囊泡（EVs）是一种纳米级细胞间信使，作为生物药物递送载体具有巨大的应用潜力。利用基因工程供体细胞用蛋白质、肽或 RNA 装载或装饰 EV 已经取得了很大进展，但分离后装载合成药物和使用天然来源的 EV 仍具有挑战性。特别是，目前仍缺乏定量和明确的数据来评估小分子与样品中其他成分相比是否以及如何与 EVs 结合。在这里，我们描述了基于疏水相互作用的小分子被动EV负载的系统性和定量特征--无论是通过疏水化合物的直接吸附，还是通过标签亲水配体的膜锚定。单囊泡成像显示，这两种配体都能与 CD63 阳性的 EV（外泌体）结合，但也能非特异性地与其他囊泡、颗粒和血清蛋白结合。疏水性化合物姜黄素和特比萘芬聚集在EV上，没有明显的饱和现象，液相色谱-高分辨质谱（LC-HRMS）定量显示，每个囊泡可聚集106-107个分子。通过定量冷冻透射电子显微镜（TEM）检测，这两种化合物的高密度 EV 负载会导致形成大量电子致密的大囊泡，降低 EV 细胞的摄取量，并使姜黄素-EV 的功能获得毒性。