SOC培养基的实验原理和质控方法
时间:2024-09-14 阅读:208
一、用途
用于基因工程菌大肠杆菌培养。
二、培养基配方(g/L)
胰蛋白胨 | 20.0 |
酵母浸粉 | 5.0 |
氯化钠 | 0.5 |
氯hua钾 | 0.186 |
氯化镁 | 0.95 |
硫酸镁 | 1.2 |
葡萄糖 | 3.6 |
pH值7.0±0.2 25℃ |
三、原理
胰蛋白胨和酵母浸粉提供基本营养,氯hua钾、氯化钠和氯化镁可维持渗透压并提供细菌生长所需的基本元素,促进有关酶的合成,葡萄糖提供碳源。
四、试验方法
1、称取本品31.4克,加热溶解于1000ml蒸馏水,分装于试管中,每管9ml,116℃高压灭菌30分钟,备用。
2、将标准质控菌株稀释至合适梯度,制备成含菌量10-100CFU/mL的菌悬液。
3、将稀释至合适梯度的标准储备菌株接种到试管中,同时接种两个平行管,置于36±1℃培养18-24h。
五、结果观察与解释
接种以下质控菌株,在36±1℃培养18-24小时:
质控菌株 | 菌株编号 | 接种量(CFU) | 生长情况 | 其他特征 |
大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | 10-100 | +++ | 浑浊 |
大肠埃希氏菌 | ATCC11775 | 10-100 | +++ | 浑浊 |
大肠埃希氏菌 | CMCC44568 | 10-100 | +++ | 浑浊 |
图1-1 SOC培养基微生物质控结果
备注:a:大肠埃希氏菌(ATCC11775),b:大肠埃希氏菌(ATCC25922),c:大肠埃希氏菌(CMCC44568),d:空白对照
六、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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