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用途:用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验。
成分(g/L):
蛋白胨 | 20.0 |
氯化镁 | 1.4 |
硫酸钾 | 10.0 |
琼脂 | 18.0 |
pH值7.4 ± 0.1 | 25℃ |
检验原理:蛋白胨和甘油提供碳氮源;氯化镁和硫酸钾促进绿脓色素和荧光素的产生;琼脂是培养基的凝固剂。
用法:称取本品 49.4g,另称取 10g甘油,溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
绿脓菌素测定用培养基(PDP)中细菌的生长情况:
绿脓菌素生成试验方法及原理:
方法:挑取可疑菌落接种在在绿脓菌素测定用培养基(PDP)斜面上,培养24小时,观察斜面有无色素。如有色素,在试管内加氯仿3.0~5.0mL,充分震摇,使培养物中的绿脓菌素提取在氯仿中,待氯仿提取液呈现绿色时,加1mol/L盐酸约1mL,震摇后静置片刻,上层盐酸溶液中呈现粉红至红色实验结果为阳性,否则为阴性。
原理:铜绿假单胞菌能产生的绿脓菌素能被氯仿提取,且在水中溶解度比氯仿大,并且会发生可逆的氧化还原反应,氧化时碱性呈蓝色,酸性呈红色。所以加入盐酸溶液并震摇后,绿脓菌素会由氯仿转移至盐酸溶液中,并在酸性环境中呈红色。
绿脓菌素测定培养基(PDP)微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24±2小时。