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李斯特氏菌显色培养基是青岛高科园海博生物技术有限公司研制,可快速检测食品和药品中单增李斯特氏菌。阴性结果可在3天内检测完成。单增李斯特氏菌显蓝色,菌落周围有一不透明环。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化钠维持渗透压,琼脂是凝固剂,氯化锂抑制革兰氏阴性菌生长,抑菌剂抑制除李氏菌外的革兰氏阳性菌生长。
成份(g/L)
营养物质 | 70.0 |
显色剂 | 6.0 |
pH 7.2±0.2 25℃ |
李斯特氏菌添加剂6.0g、李斯特氏菌抑菌剂(冻干粉)1ml*5支 (已配套,无需另购)
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
用法
称取基础培养基 14.2g 加入 180ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加剂,加入 20ml 无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动 1-2min,使其混合均匀,将二者分别于 121℃ 高压灭菌 15 min。冷至 50℃ 左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入复溶后的李斯特氏菌抑菌剂1 支,混匀,倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为 2-3mm,这样有利观察不透明环。
操作步骤
使用前,把制备好的培养基放置室温 10-20 分钟。
1、按SN标准、GB标准、FDA标准、ISO标准或其它标准制备样品液;
2、把样品液加入李氏增菌肉汤(LB1、LB2)中增菌;或把样品液和Half-Fraser增菌液按照 1:10 的比例混匀,30℃ 培养 24 小时;或其它增菌液中增菌培养;
3、取一环增菌液划线接种到李斯特氏菌显色培养基上,36℃±1℃ 培养 24-48 小时。
质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈不透明乳白色培养基。
2、微生物试验
质控菌株 | ATCC | 生长情况 | 菌落颜色 | 不透明环 |
单增李斯特氏菌 | 19114 | +++ | 蓝色 | + |
绵羊李斯特氏菌 | CICC21663 | +++ | 蓝色 | + |
斯氏李斯特氏菌 | CICC21671 | +++ | 蓝色 | - |
金黄色葡萄球菌 | 25923 | - | - | - |
大肠埃希氏菌 | 25922 | - | - | - |
鼠伤寒沙门氏菌 | 14028 | - | - | - |
黑曲霉 | 16404 | - | - | - |
典型特征
单增李斯特氏菌 36℃±1℃ 培养 24-28 小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。绵羊李斯特氏菌 36℃±1℃ 培养 48 小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。斯氏李斯特氏菌 36℃±1℃ 培养 24-48 小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围没有不透明环。在食品检测中绵羊李斯特氏菌非常少见。
贮存
制备好的固体平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
不同细菌在李斯特氏菌显色培养基上的生长特征:
李斯特氏菌显色培养基1000ml的微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置37℃需氧培养24-48小时。