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VRBA-MUG((粪)大肠菌群大肠埃希氏菌)用途:用于大肠杆菌酶底物法平板计数。
成分(g/L)
蛋白胨 | 7.0 |
酵母膏 | 3.0 |
氯化钠 | 5.0 |
乳糖 | 10.0 |
胆盐 | 1.5 |
结晶紫 | 0.002 |
中性红 | 0.03 |
琼脂 | 15.0 |
MUG | 0.1 |
pH值7.4±0.1 | 25℃ |
检验原理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可发酵的糖类;氯化钠可维持均衡的渗透压;3 号胆盐抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;结晶紫对革兰氏阳性菌如葡萄球菌、 白喉杆菌,以及绿脓杆菌、白念珠菌、表皮癣菌有杀灭作用,对其他革兰氏阴性菌和抗酸菌几乎无作用;中性红为pH 指示剂;琼脂为凝固剂;大肠埃希氏杆菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D 葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide 简称MUG)的β糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366nm 紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
以下来自平板计数法修订摘要:
VRBA-MUG平板计数法的原理是,超过96%的大肠埃希氏菌菌株(包括不产气菌株)都能产生β-葡萄糖苷酸酶,MUG被该酶分解后游离出4-甲基伞形酮,在366nm紫外光下,游离的4-甲基伞形酮发出带蓝色的荧光,而与β-葡萄糖苷结合状态的4-甲基伞形酮不显荧光,观察到带蓝色荧光即认为是大肠埃希氏菌阳性。
肠杆菌科中β-葡萄糖苷酸酶阳性的细菌除了大肠埃希氏菌之外,还有某些志贺氏菌、沙门氏菌和耶尔森氏菌,但考虑到这些菌都是致病菌,所以这种假阳性在公共卫生学上不认为是缺陷。而且,经Moberg对1400多份样品进行检验,未发现1次这种假阳性,说明这种假阳性的发生极为少见。
VRBA-MUG((粪)大肠菌群大肠埃希氏菌)用法:
称取本品41.6g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸2分钟。冷至45-50℃时,备用。无需高压灭菌。
结晶紫中性红胆盐-4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷琼脂微生物质控结果:
结晶紫中性红胆盐-4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷琼脂的微生物灵敏度试验: