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上海市所在地
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
胚胎组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7016 |
细胞简介：
鸡胚成纤维分离自胚胎；成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚胎成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞常用作ES细胞培养常用的饲养层细胞，能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子，故能有效地促进ES细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性，且分泌效果优于外源添加的一些因子，而且可以为ES细胞的培养提供类似于体内的微环境，故在研究哺乳动物ES细胞中得到广泛使用。
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮；
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介：
公司实验室分离的鸡胚成纤维采用消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的鸡胚成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态优良
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
小鼠免疫球蛋白A(IgA)试剂盒 96T/48T
小鼠泌乳素(PL)试剂盒 96T/48T
小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)试剂盒 96T/48T
小鼠卵泡抑素(FS)试剂盒 96T/48T
小鼠趋化因子(FK)ELISA 试剂盒 96T/48T
Albumin urinary (ALB) ELISA Kit 人尿微量白蛋白(ALB)试剂盒
Humanα-Actinin3,ACTN-3ELISAKit 人α-辅肌动蛋白3(ACTN-3)试剂盒 96T/48T 进口分装
GuineapigovalbuminspecificIgE,OVAsIgE试剂盒豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)试剂盒规格：96T/48T
真菌/酵母细胞脉冲凝胶电泳DNA样品制备试剂盒10次
MouseBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit小鼠骨特异性碱性0酸酶B(ALP-B)试剂盒规格：96T/48T
RAGE重组兔单克隆抗体
激活素受体样激酶1抗体
CD40重组狗 CD40 / TNFRSF5 蛋白 Protein
Nm23(NDP Kinase A,NDPKA 0.5mgNm23(NDP Kinase A,NDPKA) 转移抑制基因抗原
PADI4重组人 PAD4 / PADI4 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CRIPT Protein Human 重组人 CRIPT / cysteine-rich PDZ-binding 蛋白
S100A11 Protein Mouse 重组小鼠 S100A11 / S100C 蛋白
Nm23(NDP Kinase A,NDPKA 0.5mgNm23(NDP Kinase A,NDPKA) 转移抑制基因抗原
CRIPT Protein Human 重组人 CRIPT / cysteine-rich PDZ-binding 蛋白
CD40重组狗 CD40 / TNFRSF5 蛋白 Protein
S100A11 Protein Mouse 重组小鼠 S100A11 / S100C 蛋白
PADI4重组人 PAD4 / PADI4 蛋白 (His & GST 标签) Protein
鸡胚成纤维细胞大鼠补体因子H(CFH)试剂盒 ，英文名： CFH ELISA Kit
Mouse substance P (SP) ELISA Kit 小鼠P物质(SP)试剂盒
ELISA 小鼠氧化酶(mouse DAO) 进口分装
CLIAKitforLBPELISAKit大鼠脂多糖结合蛋白
通用型VZV(VARICELLAZOSTER)病毒定量PCR扩增试剂盒20次
ELISAKitMHC/RhLA恒河猴主要组织相容性复合体
