高纯度质粒小提试剂盒  核酸提取纯化

产品货号：26210

产品规格：50 次/100 次/200 次

产品简介：

  高纯度质粒小提试剂盒  核酸提取纯化适合提取 1-5 ml 菌液，在碱裂解法裂解细胞的基础上，采用*的硅基质膜吸附技术和试剂配方， 通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的质粒 DNA，每个吸附柱可吸附 30 μg 的质粒 DNA， 并更大限度的去除蛋白质、基因组、RNA 和其他杂质。得到的质粒 DNA 可直接用于细胞转染、PCR、酶切、测 序、连接等生物学实验。

包装清单：

自备试剂：

  使用前 Buffer PE 50 次加入 36ml 无水乙醇/100 次加入 72ml 无水乙醇/200 次加入 144ml 无水乙醇

操作步骤：

1. 取-5 ml 过夜培养的菌液加入离心管（自备）中，12000 rpm 离心 30 秒收集菌体沉淀，尽量吸弃上清。

2. 向留有菌体沉淀的离心管中加入 250μl Buffer P1，使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮菌体沉淀。 注意：如果菌块未*混匀，将会影响裂解效果，导致提取量和纯度偏低。

3. 向离心管中加入 250μl Buffer P2，温和地上下颠倒混匀 4-6 次，充分混匀使菌体裂解，此时溶液应变得清亮 粘稠。 注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组 DNA，造成提取的质粒中混有基因组 DNA的片段。

4. 此步骤所用时间应不超过 5 分钟，避免质粒受到破坏。

5. 向离心管中加入 350μl Buffer N3，立即温和地上下颠倒混匀 8-10 次，充分混匀，此时应出现白色絮状沉淀。 12000 rpm 离心 5 分钟。 注意：Buffer N3 加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。

6. 将步骤 4 中所得的上清液转移到已装入收集管的吸附柱（Spin Columns）中，12000 rpm 离心 30 秒钟，倒掉 收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

7. 向吸附柱中加入 500μl Buffer PB，12000 rpm 离心 30 秒。

8. 向吸附柱中加入 750μl Buffer PE（请先检查是否已加入无水乙醇），12000 rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中 的废液。

9. 将吸附柱置于一个新的离心管（自备）中，向吸附膜的中间部位加入 50μl BufferEB，室温放置 1 分钟，12000 rpm 离心 1 分钟，将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。