Bradford 蛋白浓度测定试剂盒

产品货号：16005

产品规格：500 次/1000 次

产品简介：

  Bradford 蛋白浓度测定试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)是根据常用的两种蛋白浓度检测方法之一 Bradford 法研制而成，实现了蛋白浓度测定的快速，稳定和高灵敏度。检测速度极快，10-20 个样品只需不足 10 分钟即可完成。灵敏度高，检测浓度下限达到 25μg/ml，小检测蛋白量达到 0.5μg，待测样品体积为 1-20μl。在 50-1000μg/ml 浓度范围内有较好的线性关系。  

  Bradford 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度 可高达 1M，二 硫苏糖醇的浓度可高达 5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保 SDS 低于 0.01%，Triton X-100 低于 0.05%， Tween 20,60,80 低于 0.015%。含去垢剂的样品*使用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒。

包装清单：

操作步骤：

1. 蛋白标准品的准备

  *融化蛋白标准品，取 10μl 稀释至 100μl，使终浓度为 0.5mg/ml。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用 什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀释标准品。

2. 蛋白浓度测定

a. 将标准品按 0、1、2、4、8、12、16、20μl 加到 96 孔板的标准品孔中，加标准品稀释液补足到 20μl， 相 当于标准品浓度分别为 0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。

b. 加适当体积样品到 96 孔板的样品孔中。如果样品不足 20μl，需加标准品稀释液补足到 20μl。请注意记录 样品体积。

c. 各孔加入 200μl Bradford 溶液，室温放置 3-5 分钟。

d. 用酶标仪测定 A595，或 560-610nm 之间的其它波长的吸光度。

e. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品中的蛋白浓度。

注意事项：

1. Bradford 溶液使用前请颠倒 3-5 次，混匀。

2. 蛋白标准请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。

3. 将 Bradford 溶液恢复到室温再使用，有利于提高检测的灵敏度。

4. 需可检测 560-610nm 之间波长的酶标仪一台，*检测波长为 595nm。并需 96 孔板。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

Bradford 溶液 4℃保存，蛋白标准-20℃保存，本试剂盒自订购之日起九个月内有效。