细胞核蛋白提取试剂盒 200 次

产品货号：26111

产品简介：

  细胞核蛋白提取试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞的细胞核和细胞浆蛋白，所提取蛋白保持生物学活性。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高，有效避免核/浆蛋白的交叉污染，可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。

产品内容：

操作步骤：

1.请在蛋白抽提前取出抽提试剂 A、B 和 C 进行预冷

2.收集细胞，计数。离心去上清。

3.1×10 7细胞中加入 0.5ml 细胞核抽提试剂 A，涡旋 5 秒以充分混匀，冰上孵育 10 分钟。

注意：

  各种细胞的特性不同，需要根据不同细胞的特性调整细胞核抽提试剂 A 的用量，如果蛋白浓度 小，按比例减少细胞核抽提试剂 A 及后续细胞核抽提试剂 B、C 的用量。

4.4℃ 3000 rpm 离心 10min，吸弃上清。

5.加入 374μL 细胞核抽提试剂 B，再加入 26μL 细胞核抽提试剂 C

6.将步骤 5 中溶液加入玻璃匀浆管中，用玻璃匀浆管冰上反复匀浆 20 次，冰上孵育 30min。 7.4℃ 12,000 rpm 离心 20 分钟，收集上清（尽量收集干净上清液）至新的离心管中，-20℃ 8.保存（此提取液为胞核蛋白）。

注意事项：

1.如需提取磷酸化蛋白请在抽提试剂中加入磷酸酶抑制剂。

2.所有样品操作请置于冰上进行。

3.可以采用更高的速度来离心。

4.根据实验需求，细胞核抽提试剂 A& B 使用前加入合适的蛋白酶抑制剂。