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上海市所在地
产品名称:细胞膜蛋白、胞浆蛋白/核蛋白提取试剂盒
产品货号:26141
产品规格:50次/100次
产品简介:
该产品用于分离提取真核细胞的细胞膜蛋白、胞浆蛋白/核蛋白。
产品内容:
产品名称 | 包装 | 储存条件 |
---|---|---|
Harvest Buffer | 25ml/50ml (使用前加入 25μl/50μl DTT 溶液) | 4℃保存 |
Buffer A | 25ml/50ml (使用前加入 25μl/50μl DTT 溶液) | 4℃保存 |
Buffer C | 100ml/200ml (使用前加入 100μl/200μl DTT 溶液) | 4℃保存 |
DTT 溶液 | 0.5ml/1ml | -20℃保存 |
操作步骤:
1. 收集 10 6-5×10 6 个细胞于 1.5ml 离心管中,用 PBS 清洗。
2. 将细胞重新悬浮于 250-500μl Harvest buffer 中,冰上孵育 5min。
3. 1000rpm 离心 10min,收集上清至新离心管中,同时留沉淀。
4. 12000rpm 离心 15min,收集上清至新离心管中(此部分溶液包含胞浆蛋白和膜蛋白)。
5. 将步骤 3 中沉淀重悬于 500μl Buffer A 中,1000rpm 离心 5min,弃上清。
6. 加入 4 倍体积 Buffer C,4℃涡旋(或反复涡旋/冰上孵育)15min。
7. 4℃,12000rpm 离心 10min。 8. 收集上清至新离心管中(此部分溶液包含核蛋白)。
注意事项:
1. 需自备 PMSF。PMSF 一定要在抽提试剂加入到样品中前 2-3min 内加入,以免 PMSF 在水溶液中很快 失效。PMSF 可以向本公司订购。
2. 抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或 4ºC 进行。
3. 本试剂盒对于细胞样品,仅适合于真核细胞。
4. 使用本试剂盒抽提到的蛋白可直接用本公司生产的 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。但不适合 用 Bradford 法测定蛋白浓度。
5. 本产品*于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于 普通住宅内。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。