MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

产品货号：P20311

产品规格：500次

产品简介：

  MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用 于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT 可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物 Formazan。在特 定溶剂存在的情况下，可以被*溶解。然后通过酶标仪可以测定 570nm 波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快， 则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。

  本试剂盒采用了*的 Formazan 溶解液配方，无需去除原有的培养液，可以直接加入 Formazan 溶解液溶解 Formazan。从而避免了由于去除培养液时 Formazan 被部分去除而引起的误差。

  本试剂盒本底低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便。

  本试剂盒可以测定 500 个样品。

包装清单:

操作步骤：

1. 通常细胞增殖实验每孔加入 100μl 2000 个细胞，细胞毒性实验每孔加入 100μl 5000 个细胞(具体每 孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定)。按照实验需要，进行培养并 给予 0-10μl 特定的药物刺激。

2. 每孔加入 20μl MTT 溶液，在细胞培养箱内继续孵育 4 小时。

3. 每孔加入 100μl Formanzan 溶解液，在细胞培养箱内再继续孵育。直至在普通光学显微镜下观察发现 Formazan 全部溶解。通常 37℃孵育 4 小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解 的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会长一些，建议室温或 37℃过夜孵育。

4. 在 570nm 测定吸光度。如无 570nm 滤光片，可以使用 560-600nm 的滤光片。

注意事项 ：

1. 由于使用 96 孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于 96 孔板周围一 圈容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加 PBS、水或培养液；另一方面，可以把 96 孔板置于靠 近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。

2. MTT 溶液在 4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以 20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。

3. Formazan 溶解液结冻或产生沉淀时可以 37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。混 匀过程请用移液枪轻轻吹匀，勿上下颠倒，避免气泡。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操