维生素C检测试剂盒(磷钼酸比色法)

产品货号：R23240

产品规格：50T/100T

产品说明：

   维生素C(Vita minC)又称L-抗坏血酸，是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素，在生物体内维生素C是一种抗氧化剂，为酸性己糖衍生物，是稀醇式己糖酸内酯，保护身体免于自由基的威胁，同时也是一种辅酶，其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。Vc有L-型和D-型两种异构体，只有L-型的才具有生理功能，还原型和氧化型都有生理活性。

维生素C检测试剂盒(磷钼酸比色法)检测原理是在强酸和偏磷酸的根离子存在条件下，钼酸铵能与维生素C反应蓝色化合物，在一定浓度范围(样品浓度控制在25~250μg/ml)，吸光度值与浓度呈线性关系，以分光光度计760nm处检测吸光度，获得Vita minC含量。该试剂盒主要用于植物组织中的维生素C(抗坏血酸)的检测，其优点是：1、反应迅速；2、操作简便；3、还原糖及其他常见的还原物质对实验没有干扰，因此专一性好。

本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

自备材料：

1、蒸馏水

2、离心管或试管

3、离心机

4、水浴锅或恒温箱

5、比色杯

6、分光光度计

操作步骤(仅供参考)：

1、稀释组织匀浆液：按组织匀浆液(5×)：蒸馏水=1：4的比例稀释，获得1×组织匀浆液。

2、准备样品：取待测材料如青菜、水果、松针等，清洗擦干，准确称量5g，加入研磨器内，再加入少量1×组织匀浆液，研磨碎，留取上清，再次用 1×组织匀浆液研磨，最后

一并倒入50ml离心管，补充1×组织匀浆液至45ml，充分混匀，4000g离心5min，取0.5 ml上清液，加入等量蒸馏水，即为待测液。

3、配制MPA工作液：取一支1.5gMPA粉末，充分溶解于50ml酸性缓冲液中，4℃保存3~4天有效。

4、配制系列Vita min C标准：取干净离心管或试管，按下表进行操作，依次稀释。

5、Vita min C加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的Vita min C含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置2平行管，求平均值。

6、Vita min C测定：立即混匀，30℃水浴15min，以空白调零，比色杯光径1cm，以分光光度计测定760nm处系列标准管、测定管的吸光度。

计算：以系列标准Vita min C (25、50、75、100、125、150、200、250μg)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，求得回归方程，以测定管的吸光度代入回归方程求得维生素C含量。

100g 样品中维生素C含量(mg)

 =( m0×V1) ×100/[(m1×V2)×1000]=( m0×V1) /[( m1×V2)×10]

式中：  m0 : 根据待测样品的吸光度值在标准曲线上查出的维生素C的质量(μg)

V1 : 待测液的总体积( ml)

m1 : 样品质量(g)

V2 : 测定时取样体积( ml)

1000 : μg换算成mg

注意事项：

1、上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。

2、组织匀浆液(5×)久置或低温保存，容易产生乳白色浑浊；如果白色浑浊不明显，可以直接使用，不影响效果；如果白色浑浊较多，应弃用。

3、Vita min C Assay buffer 室温保存时间过长或者过期会出现白色粘稠物，即不可使用，应换新的产品使用。不使用时建议4℃保存。

4、待测样品如不能及时测定，应置于2~8℃保存，3天内稳定。

5、如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。

保存条件：

    6个月有效。4℃运输，4℃保存。

附录1：标准曲线制作：尚宝在室温条件下按说明书操作，用分光光度计对系列标准进行吸光度的测定，其数值及标准曲线如下(仅供参考)：