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小鼠小胶质BV2细胞
BV2【BV-2】 | |
l 细胞鉴定 | 种属鉴定已通过 |
l 细胞来源 | 国家资源库 |
l 细胞背景 |
该细胞来源于德国DSMZ(German collection of microorganisms and cell cultures),源于C57BL/6小鼠小胶质细胞,表达核v-myc、染色体v-raf癌基因,表面表达envgp70抗原,在形态学、表型及功能上有吞噬细胞的特征。 免疫组化结果显示细胞为MAC1,MAC2阳性,而MAC3,胶质细胞原纤维酸性蛋白,半乳糖脑苷脂为阴性。 |
l 细胞特性
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1) 来源:小鼠脑
2) 形态:上皮细胞样 松散贴壁,悬浮和贴壁细胞混合生长
3) 含量:>1x106 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。 |
l 培养条件: | 1)准备 DMEM 基础培养基 (推荐:awcell-0001) 87% 优质胎牛血清 10% GlutaMAX-1谷氨酰胺 (推荐:awcell-0900 ) 1% HEPES 1M Buffer solution (推荐:awcell-01200) 1% P/S青霉素-链霉素 1%.
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度。 |
l 注意事项:
| 小鼠小胶质BV2细胞该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞,传代可以参考以下方法:
1. 收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10�S的培养基来终止消化。
3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的*培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 |
l 运输形式: | 低温:(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 常温(2) T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 |
l 生物安全: |
1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。 |