高效液相色谱法测定食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的含量
时间:2024-06-24 阅读:1815
甜食少吃!食品中的糖含量不容忽视
摘要
目的:使用皖仪高效液相色谱仪搭配示差折光检测器检测食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的含量。
方法:采用示差折光检测器及Nova Atom NH2,4.6x250mm,5μm色谱柱,流动相为70%乙腈;流速为1.0ml/min;柱温为40℃;进样体积为10μl。建立标准曲线,通过外标法计算目标物含量。
前言
糖类是自然界中广泛分布的一类重要的有机化合物。日常食用的蔗糖、粮食中的淀粉、植物体中的纤维素、人体血液中的葡萄糖等均属糖类。糖类在生命
活动过程中起着重要的作用,是一切生命体维持生命活动所需能量的主要来源。植物中最重要的糖是淀粉和纤维素,动物细胞中最重要的多糖是糖原。但是摄入糖分过多会引发糖代谢问题,因此对食品中糖含量进行检测是十分必要的。
本文参考《GB 5009.8-2023食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定》进行检测,新标准修改了第一法高效液相色谱法的适用范围,保留了饮料类,新增了糖果样品中5种糖的测定,并将《GB 5009.8-2016》中的谷物类、乳制品、果蔬制品、蜂蜜、糖浆等扩大至粮食及粮食制品、乳及乳制品、果蔬及果熟制品范畴。
关键词:液相色谱;示差折光检测器;食品安全国家标准;果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖。
1 实验方法
1.1 仪器配置
高效液相色谱仪LC3200系列
表1高效液相色谱系统配置清单
1.2 测试条件
色谱柱:Nova Atom NH2,5μm,4.6x250mm
柱温:40℃;
检测器:示差折光检测器
流速:1.0ml/min;
流动相:乙腈/水=70/30(体积比)
进样量:10μL;
示差折光检测器条件:温度45℃。
1.3 仪器及试剂、耗材
试剂:超纯水乙腈(色谱纯)
标准物质:果糖(麦克林)、葡萄糖(damas-beta)、蔗糖(general-reagent)、麦芽糖(麦克林)、乳糖(阿拉丁)
辅助装置:分析天平;
溶剂抽滤装置;
超声波清洗机;
实验材料:滤膜:水相滤膜0.45μm。
1.4 溶液配制1.4.1 混合标准储备液(20.0 mg/ml):
分别称取经过 90 ℃士2 ℃干燥2h的果糖和 96 ℃士2 ℃干燥2 h的葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖各1g(精确至 0.001 g),用水溶解后转移至 50 mL,容量瓶中,加入2.5 mL乙腈,用水定容至刻度。置于0℃~4 ℃密封,保存期3个月。
1.4.2 混合标准工作液:
吸取 0.100ml、1.00ml、2.00ml、3.00mL和 5.00ml 混合标准储备液(20.0mg/ml)于 10.0ml, 容量瓶中,用水定容至刻度,配得果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖的质量浓度为0.200mg/ml,、2.00mg/ml,4.00mg/ml,6.00mg/ml, 和 10.0mg/ml, 的混合标准工作液,可根据实际样品溶液的浓度适当调整混合标准工作液浓度。临用现配。
1.4.3 样品配制:(糖浆和蜂蜜类试样)
称取混匀后的试样1g~2 g(精确至 0.001g)于100ml, 容量瓶中,加入约50mL水,涡旋混匀至充分溶解,转移至100ml容量瓶中并用水定容至刻度,混匀,静置。
2 结果与讨论
2.1 空白
2.2 系统适用性
图2 果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖标准品色谱图
表1果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖标准品色谱参数表
分析:本次分析果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖结果较好,各色谱峰之间分离度>1.5,满足分离要求。
2.2 标准曲线
根据1.4.2配制标准系列溶液,建立标准曲线方程及线性相关系数,检测结果如下:
图2 果糖标准溶液曲线方程及相关系数
图3 葡萄糖标准溶液曲线方程及相关系数
图4 蔗糖标准溶液曲线方程及相关系数
图5 麦芽糖标准溶液曲线方程及相关系数
图6 乳糖标准溶液曲线方程及相关系数
分析:标准曲线线性范围较好,线性相关系数>0.999
2.3 重复性
图4 果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖标准品重复性谱图(n=7)
表2 果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖重复性色谱参数表(n=7)
分析:五种糖类标准品连续进样7次,重复性结果较好,果糖保留时间重复性RSD值为0.108%;峰面积重复性RSD值为0.345%;葡萄糖保留时间重复性RSD值为0.153%;峰面积重复性RSD值为1.272%;蔗糖保留时间重复性RSD值为0.215%;峰面积重复性RSD值为0.664%;麦芽糖保留时间重复性RSD值为0.257%;峰面积重复性RSD值为0.976%;乳糖保留时间重复性RSD值为0.221%;峰面积重复性RSD值为1.395%。
2.4 样品
图5 枇杷秋梨膏样品色谱图
表3 枇杷秋梨膏样品色谱参数
分析:枇杷秋梨膏中不含乳糖,其中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量分别为:5.719728mg/mL、6.583038mg/mL、0.120169mg/mL、0.743335mg/mL。
3.结论
使用皖仪高效液相色谱仪LC3200系列搭配示差折光检测器进行检测,本次分析果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖结果较好,各色谱峰之间分离度>1.5,满足分离要求。结果显示:标准曲线线性范围较好,线性相关系数>0.999;五种糖类标准品连续进样7次,重复性结果较好,保留时间RSD值<0.3%,峰面积重复性<1.5%。