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【白细胞介素18(IL-18)简介】:是一种蛋白质,由IL18基因编码。该基因编码的蛋白质是一种促炎症细胞因子。许多细胞类型,包括造血细胞和非造血细胞,都有可能产生IL-18。最初,IL-18的产生是在Kupffer细胞、肝脏驻留的巨噬细胞中被认可。然而,IL-18在非造血细胞,如肠道上皮细胞、角质细胞和内皮细胞中也有构成性表达,它可调节先天性和适应性免疫,其失调可引起自身免疫性或炎症性疾病。
【产品用途】:本试剂盒仅供科研使用,定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中牛白细胞介素18(IL-18)的含量。凡订购我司任意一款试剂盒均享受免费代测服务,欢迎咨询、订购!
技术小提示:
1. 用户在初次使用IL-18试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2. 不同批次的试剂禁止混用
3. 本公司提供的96孔酶标板是单条可拆卸型酶标板,用户按需求使用;剩余的酶标板请按保存条件贮存。在操作过程中避免酶标板干燥,干燥会使酶标板上生物成份迅速失活。
4. 为避免交叉污染,避免重复使用手中的吸头和试管。
5. 揭封板膜和覆盖封板膜时应避免用力过大导致液体溅出。
IL-18试剂盒组成:(检测范围请参考说明书)
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 品牌 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 轩泽康 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 轩泽康 |
稀释液 | 6mL | 3mL | 轩泽康 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 轩泽康 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 轩泽康 |
底物B | 6mL | 3mL | 轩泽康 |
终止液 | 6mL | 3mL | 轩泽康 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 轩泽康 |
说明书 | 1份 | 1份 | 轩泽康 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 轩泽康 |
未开封的试剂盒:(上海轩泽康生物ELISA试剂盒保质期为6个月,且提供新批次)
所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。
使用后的试剂盒怎样保存:
使用后的剩余试剂盒建议在实验后1个月内使用完毕。剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。
实验需要自备仪器及设备:
1)450nm滤光片酶标仪(Standard microplate reader)
2)高精度加样器及枪头(Precision pipettes and Disposable pipette tips.)
3)37摄氏度恒温箱(37 ℃ incubator)
操作流程如下:
【平衡试剂盒至常温】:取出实验过程中所需板条,剩余半条用自封袋密封放回4摄氏度。
【加样】:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。在样本孔先加样本10μl再加稀释液40μl,(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
【加酶】:标准品孔和样本孔总每孔加入酶标试剂100μl(辣根过氧化物酶标记的检测抗体)空白孔除外。
【温育】:用封板膜封住反应孔,37℃恒温箱温育60分钟。
【配液】:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
【洗涤】:小心揭掉封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置60秒后甩去洗涤液,吸水纸上拍干。如此重复5次(也可用洗板机洗板)。
【显色】:每孔先加入底物溶液A 50μl,再加入底物溶液B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光孵育15分钟。
【终止】:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
【测定】:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
上海轩泽康生物ELISA试剂盒种类繁多,根据产品名称原理大致分为间接法、夹心法、竞争法、捕获包被法(也称为反向间接法,比较少见)。其中各类型试剂盒的基本原理可电询我司业务人员进行详细了解。以下是关于各类型ELISA试剂盒及适用类型:
①间接法:测定总抗体或IgG抗体
②抗体夹心法:测定二价或二价以上大分子抗原
③抗原夹心法:测定抗体
④抗体竞争法:测定抗体
⑤抗原竞争法:测定只有一个抗原决定簇的小分子半抗原
⑥捕获包被法:测定IgM,传染病的早期诊断
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