本视频为厦门逸漠生物出品关于冻存细胞收货处理指南，我们对每一步操作都做了演示，以便实验者在收到细胞后，能正确地处理和复苏。

冻存细胞复苏实验准备

细胞培养基、6cm培养皿、10cm培养皿、酒精、紫外照射30min消毒灭菌

冻存细胞到货处理

1.提前打开水浴锅设置37C

2.在细胞间拆封包裹，取出冻存细胞

3.检查管身是否在运输过程中破损，内容物是否熔化，阅读细胞说明书和检查检测报告

冻存细胞复苏步骤

第一步：将取出的冻存管迅速放入37C水浴锅中，轻轻摇晃，使细胞快速融化解冻，最好在1min内完成

第二步：将冻存管移入离心机中1000rpm离心3min

第三步：取3mL培养基到一个新的6cm培养皿中，在培养皿上标记细胞名称，日期和所用培养基名称

第四步：拿出一个新的10cm培养皿，加入8-10ml培养基，在皿上标记细胞名称，培养基名称，日期

第五步：离心后，以75%酒精喷冻存管外部，移入无菌操作台内，从冻存管中吸走上清，用1ml培养基重后，移入6cm中，“8字法 ”摇匀，镜检是否铺匀，把培养皿放入C02培养箱中培养，第二天观察贴壁情况

注意事项

1.操作冻存细胞时应使用手套、工作服和防护面具等，以避免事故的发生

2.复苏细胞时，应保持管盖拧紧，将管盖以下部分浸入37℃水浴中解冻，解冻过程要快

3.部分比较脆弱的细胞可不用离心，直接用培养基稀释细胞悬液后进行培养，但要及时通过换液等方式除去含DMSO的细胞冻存液

4.请参照细胞说明书推荐的培养基和操作方法来培养细胞