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通用细胞冻存液(无血清)
产品简介:
随着实验室细胞培养的发展 , 除了原代培养之外 ,人工开发出来的细胞系的保存越来越重要 ,冷冻保存细胞系的优点如下:
1、减少基因漂移;
2、减缓细胞系的衰老;
3、稳定表型;
4、减少微生物污染及交叉污染机会等。
细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤,从提高细胞复苏时的存活率 ,细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得 1:10~ 1:20 的稀释 ,稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜,这是因为当低温保护剂稀释 10 ~20 倍以后,该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。
DUMABIO 通用细胞冻存液(无血清)主要由培养基、 DMSO 等组成 ,不含血清 ,是一种 经典的无菌冻存液,用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。
该试剂只用于科研领域 ,不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
自备材料:
1、 细胞计数器、细胞冻存管、超低温冰箱或液氮、超净工作台
2、 胰蛋白mei消化液、顽全培养基
通用细胞冻存液(无血清)
操作步骤(仅供参考):
1、 培养细胞至对数生长晚期 ,显微镜观察其外观、形态、有无污染等 ,取状态良好的细胞进行冻存操作;如为贴壁生长细胞 ,用胰蛋白mei消化并用顽全培养基终止消化 ,进行细胞计数;如为悬浮生长细胞 ,进行细胞计数。
2、 500~ 1000g 离心 5min ,弃上清。
3、 加入适量的通用细胞冻存液 ,重悬细胞 ,使细胞浓度达到 1~10 ×106/ml,置于冻存管中 ,密闭、不要拧的太紧 ,避免弯曲变形。
4、 一般遵循 1℃/min 的速率进行冷冻;亦可采用 4℃ 20min ,-20℃ 30min ,-70℃ 过夜 ,最后置于液氮罐中长期存储。
注意事项:
1、 注意在超净工作台内无菌操作 ,尽量避免污染。
2、 初次使用融化后可在 4℃保存 1 个月 ,但应减少反复冻融的次数 ,以免失效。
3、 试剂开封后请尽快使用 ,以防影响后续实验效果。
4、 杂交瘤细胞冻存时应定期复苏 ,检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性。
5、 为了您的安全和健康 ,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:
12 个月有效。低温运输 ,4℃保存。
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