猪封闭蛋白3(CLDN3) ELISA 试剂盒 

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

猪封闭蛋白3(CLDN3) ELISA 试剂盒   

样本处理

在处理样本时，需要保证无菌操作，避免污染。同时，需要按照试剂盒说明书的要求，将样本进行适当的稀释和处理。如果样本中存在杂质或颗粒物，需要*行离心或过滤处理。

ELISA试剂盒如何操作

ELISA试剂盒的操作步骤如下：

1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml，酶标板中每孔加入50μl，室温、4℃或37℃过夜包被。

2.洗涤：弃包被液（用力拍干，再用无尘纸吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次（每孔均要加满），每次3min~5min。

3.封闭：每孔加封闭液（1%BSA）250μl，37℃封闭2h。

4.洗涤：用1×PBST洗涤液洗板3次，每次3min~5min。

5.结合一抗：用1×PBST缓冲液1∶1000稀释被检血清，每孔100μl，要设立阴性对照，37℃孵育1.5h。

6.洗涤：同上。

7.结合酶标二抗：每孔加1×PBST缓冲液1000倍稀释的酶标二抗羊抗鼠IgG-HRP（稀释倍数根据产品不同有所不同，可按说明书进行）50μl，37℃孵育1h。

8.洗涤：同上。

9.显色：每孔加底物溶液（TMB）50μl，置室温避光显色10min。

10.待显色后，每孔加入50μl终止液（2mol/L H2SO4）终止反应。使用酶标仪读取450nm的OD值，以确定血清抗体水平。

以上步骤仅供参考，具体操作请根据实际情况和产品说明书进行。

ELISA测定结果如何计算

ELISA测定结果计算方法如下：

1.计算阴性对照A值的平均数(NCX )和阳性对照A值的平均数(PCX)。

2.两个平均数的差(P-N)必须大于一个特定的数值，例如0.400，试验才有效。

3.3个阴性对照A值均应≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范围，则弃去，而已另两个阴性对照重新计算NCX；如有两个阴性对照A值超出以上范围，则该次实验无效。

4.阳性判定值按下式计算：阳性判定值=NCX+0.05。

5.标本A值>阳性判定值的为阳性，小于阳性判定值的为阴性。

需要注意的是，试剂盒的常数只适合于该特定条件下，而不是对各种试剂均可通用。

注意事项

1. 实验前请仔细阅读本试剂盒的使用说明，确保所有材料、器具和试剂准备齐全。

2. 为保证实验结果的准确性，请务必遵循实验步骤进行操作，并注意控制实验条件的一致性。

3. 实验过程中请勿触摸酶标板上的酶标抗体区域，以免影响实验结果。

4. 实验结束后请及时清洗并整理实验器具，避免交叉污染。

5. 本试剂盒仅供体外诊断使用，使用前请仔细阅读说明书，如有疑问请及时联系厂家或专业技术人员。

公司简介

     上海笃玛生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。总部位于上海，并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“笃玛生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及*的仓储和物流系统。“笃玛生物”已经得到全国科研工作者的认可。

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