NAD-苹果酸酶（NAD-ME）测试盒

产品简介
苹果酸酶是生物体内重要的酶之一，广泛存在于动物、植物、细菌体中。是苹果酸代谢的关键酶。近年来植物ME活性测定较多，已经成为抗氧化研究的热点。该酶发挥作用需要辅酶因子的参与，依据辅酶因子的不同，分为NAD-ME(EC 1.1.1.38)和NADP-ME(EC 1.1.1.40)。
ME的主要功能是催化苹果酸氧化脱羧产生酸和CO2，以及伴随NAD(P)+的还原反应，NADP-ME催化NAD+还原成NADH，本试剂盒通过检测NADH在340nm处的增加速率即可得出NAD-ME的酶活性大小。

中文名称NAD-苹果酸酶(NAD-ME)活性检测试剂盒
储存条件-20℃
有效期6个月
英文名称NAD Malic Enzyme(NAD-ME) Activity Assay Kit
别名NAD-苹果酸酶试剂盒 NAD-ME Kit NAD-苹果酸酶（NAD-ME）试剂盒 NAD-苹果酸酶（NAD-ME）测试盒
检测方法微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader；紫外分光光度法 Spectrophotometer

测定意义
   ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中，尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应，产生酸和CO2，以及伴随NAD(P)+的还原反应，是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多，已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同，可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。

测定原理
   NAD-ME催化NAD+还原成NADH，在340nm下测定NADH增加速率。
需要的仪器，耗材:紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
以上数据均来自公开文献, 仅供参考。

样本测定的准备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 1000~2000:1 的比例(建议 2000 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。

NAD-苹果酸酶（NAD-ME）测试盒
检测方法:微量法
本品仅用于科研实验,不用于临床。

生化检测试剂盒的基本原理
 生化检测试剂盒,又称生化试剂盒,是利用特定的生物成分、动力学及化学反应等技术制备的试剂盒,用于检测生理学、病理学、药理学等领域中特定的生物分子或化学物质。生化检测试剂盒包括底物、酶试剂盒、探针等多个组成部分,其中的是底物-酶法.
底物-酶法是生化检测试剂盒检测的基本原理。在该过程中,底物与酶在细胞膜上结合形成基质酶,进而形成庇物-酶复合物。随着时间的推移,底物-酶复合物逐渐分解,释放出分子小的底物和分子大的未消化的底物,未消化的底物可以被一系列的酶代谢,同时底物、酶和代谢产物都会对复合物的稳定性产生影响,从而影响检测试剂盒的检测结果。

生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?
 生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:
1)于生化检测而言,样本最-好无溶血、脂血、黄-热的现象,组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。

2)样本处理后最-好尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。
3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。
4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。

苹果酸酶 malic enzyme
已知有三种苹果酸酶（ME1．1．1．38—40）。其中以NADP为受体的酶（ME1．1．1．40）催化生成下列反应：
ΔG°′=-0.36千卡。酸羧化反应（是H．G．Wood和C．H．Werkman，1938最初发现的反应）中有的是苹果酸酶的作用，有的是酸羧化酶的作用，在生物体内已知以后者的作用为主。两者都是供给三羧酸循环中间体的补充反应。苹果酸酶在胞浆内催化苹果酸脱羧是乙酰CoA从线粒体进入胞浆的柠檬酸--酸循环的一部分，其产生的NADPH很多将用于脂肪酸的合成。
ME1是一种普遍存在的四聚体蛋白，可以催化可逆的氧化脱羧反应的L-苹果酸转变为酸，这个反应涉及到了NAD(P)+ 向 NAD(P)H的转化，将糖酵解途径和柠檬酸循环联系起来。